Diphtheriebacülus. Darstellung des DipMherietoxins. 225 



konnte, keimfreie Filtrate von stark giftigen Eigenschaften, wogegen 

 andererseits die aus den Bacterienleibern in besonderer Weise herge- 

 stellten Extrakte eine relativ geringe Giftvvirkung entfalteten. Sobernheifn. 



Brieger und Boer (592) haben zur Darstellung des Diph.-Toxins 

 Culturen der D.-B. in Peptonbouillon und steril aufgefangenem flüssigen 

 Blutserum benutzt. Die Culturflüssigkeiten wurden, nachdem die Bacterien- 

 leiber „in der üblichen Weise" entfernt worden waren, mit Iproc. Zink- 

 chloridlösung versetzt, und der entstehende Zinkniederschlag nun durch 

 combinirte Behandlung mit gewissen Ammoniakderivaten (Ammonium- 

 bicarbonat, Ammoniumphosphat, Ammoniumsulfat) weiter zerlegt. Auf diese 

 Weise gelang es ihnen schliesslich eine Substanz zu erhalten, welche das 

 Diph. -Toxin quantitativ einschliesst und von den anhaftenden Spuren 

 mitgerissenen Peptons durch Auflösen in Wasser und Schütteln mit fein 

 gepulvertem Natriumsulfat in der Regel befreit werden kann. 



Bei Züchtung der D.-B. auf eiweiss freiem Nährboden, vorzugsweise 

 auf dialysirtem Menschenurin, erhielten Verflf. mit Hülfe der angegebenen 

 Methode sofort ein eiweiss- und peptonfreies Diph.-Toxin. 



Das Diph.-Toxin kann somit nicht zu den Eiweisskörpern gezählt werden 

 und wird durch schwache Alkalien, sowie durch reducirende Substanzen 

 wenig angegriffen, dagegen durch Säuren, selbst Kohlensäure, sowie oxy- 

 dirende Substanzen, ferner auch Alkohol, Aether, Aceton u. s. w. mehr 

 oder minder rasch zerstört. 



Thiere, welche mit diesem Toxin immunisirt wurden, lieferten ein specifisch 

 wirksames Diph.-Serum, so dass die von Verff. dargestellte giftige Substanz 

 wohl in der That als speciflsches Diph.-Gift anzusehen ist. 



Reste des löslichen Diph. -Giftes wurden auch aus den Leibern der 

 D.-B. durch mehrstündiges Schütteln mit concentrirtem Ammoniumchlorid 

 extrahirt. 



Eine zweite lösliche Substanz konnte aus den des specifischen Giftes 

 völlig beraubten Bacterienleibern dadurch gewonnen werden, dass die letz- 

 teren getrocknet und dann nochmals mit Ammoniumchlorid und wiederholt 

 mit destillirtem Wasser geschüttelt wurden. Die aus diesen Lösungen durch 

 Aussalzen mit Ammoniumsulfat zur Ausscheidung zu bringende Substanz war 

 gleichfalls eiweiss- und peptonfrei, aber selbst in grössten Mengen ungiftig. 



Wurden die Bacterienleiber nach allen diesen Proceduren in gepulvertem 

 Zustande Meerschweinchen subcutan injicirt, so gingen die Thiere nach 

 Dosen von 0,01 g unter Nekrotisirung und Eiterung an der Injectionsstelle, 

 zu Grunde. Es beweist dies das Vorhandensein einer dritten Substanz, 

 welche giftige nekrotisirende Eigenschaften besitzt, aber fest an den Bac- 

 terienkörpern haftet und in den gebräuchlichen Agentien unlöslich ist. 



Auch die Darstellung und Reinigung des Tetanustoxins nach der 

 gleichen Methode haben Verff. mit Erfolg versucht, doch ist nach iliren Er- 

 fahrungen die ursprüngliche Art der Gewinnung durch Behandlung mit 

 Amnioniumsulfat (Bkikgkk und Fraenkel') und Ausfällung des wieder 



1) Jahresber. VI, 1890, p. 344. Ref. 



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