226 Diphtheriebacülus. Gewinnung wirksamen Diphtherietoxins. 

 Giftigkeit verschiedener Diphtheriecultmen. 



in Lösung gebrachten Toxins durch eine schwache Sublimatlösung vorzu- 

 ziehen, da die Zerlegung des Zinkniederschlags gewisse Schwierigkeiten 

 zu bereiten pflegt. 8obernhei?n. 



Nicolle (712) giebt folgende Vorschrift für die sichere und rasche Ge- 

 winnung eines wirksamen Diph. -Toxins: 



500 g f r i s c h e s Eindfleisch (von einem am Morgen geschlachteten Thiere !) 

 werden fein zerhackt, mit 1 1 Wasser versetzt und über Nacht bei einer 

 Temperatur von 10-12^ gehalten. Nun fügt man 2*^/o Pepton und 0,5 '^/^ 

 Kochsalz hinzu, kocht auf, filtrirt, alkalisirt ziemlich stark und erhitzt 10 

 Minuten auf 120'^. Hierauf wird nochmals filtrirt und das Filtrat in Gefässe 

 eingefüllt, in denen die endgiltige Sterilisirung durch viertelstündiges Er- 

 hitzen auf 115^ erfolgt. 



Die so hergestellte Nährbouillon wird nun mit frischer Diph.-Cultur ge- 

 impft und 5 Tage bei 37*^ (ohne Duixhleitung eines Luftstromes) gehalten. 

 Die keimfreien Filtrate derartiger Culturen tödten Meerschweinchen von 

 500 g in der Dosis von ^/^^ ccm nach subcutaner Impfung innerhalb 48 

 Stunden. Die Filtrate 7tägiger Culturen pflegen noch wirksamer zu sein. 



Mit einer, nach dem Vorschlage Speonck's\ aus älterem Fleisch herge- 

 stellten Bouillon hat N. weniger günstige Resultate erhalten. Sobernheim. 



Madsen (694) hat beobachtet, dass die Giftigkeit der verschie- 

 denen Diph. -Culturen sehr variirt und versucht, die Ursachen dieser 

 Verschiedenheit festzustellen. Zur Untersuchung dienten ausser selbst ge- 

 züchteten D.-B. Culturen aus London, Stockholm, Warschau. Zur Züchtung 

 wurde Bouillon von Kalbfleisch mit Zusatz von 1^/^ Witte's Pepton und 

 ^/s^/o ClNa benutzt. Mittels einer Normalnatronlösung (Indicator: Phenol- 

 phthalein) stellte Verf. die Bouillon meist auf dieselbe Alkalinität ein. 



Gewöhnlich wurden die Culturen nach 3-4 Wochen filtrirt und mittels 

 Toluol sterilisirt, nachdem Verf. durch mikroskopische Untersuchung mit 

 derSALOMONSEN'schenCarbolfuchsinmethode ihre Reinheit festgestellt hatte. 

 Zur Prüfung der Toxicität injicirte M. Meerschweinchen subcutan 0,1 ccm 

 auf 500 g Körpergewicht; die Zeit, die bis zum Eintritte des Todes ver- 

 läuft, giebt ein ziemlich brauchbares Maass für die Stärke ab, nur müssen 

 immer möglichst dieselben Versuchsbedingungen eingehalten werden. 



Die Verschiedenheiten der Culturen zeigen sich schon darin, dass viele 

 sauer reagiren und immer ungiftig sind, andere alkalisch reagiren und dann 

 zuweilen ganz schwach toxisch, beinahe ungiftig, meistens aber stärker 

 toxisch sind. 



Diese verschiedene Giftigkeit ist nach Verf. unabhängig von : 1 . Infection 

 der Culturen mit anderen Bacterien; 2. Glas und Form der Kolben; 3. der 

 Menge der Aussaat; 4. stetiger Strömung von Luft über die Culturen ; 5. dem 

 Alter des Fleisches; 6. der Sterilisationsweise. Dagegen bewirkt der Zu- 

 satz von kohlensaurem Kalk, dass der Säuregrad, bei welchem die Bacterien 

 gedeihen, nicht überschritten wird, so dass sie weiter wachsen und Toxin 

 produciren können. 



1) Jahresber. XI, 1895, p. 205. Ref. 



