794 Allgemeine Methodik. Modificiiung der GRAM'sclien Färbemethode. 



färbung nacli Weigert mit Anilinxylol, weniger schonend mit reinem 

 Anilin, dann mit Alkohol nach Gram\ am wenigstens schonend ist Be- 

 handlung mit Säurealkohol nach Eibbert (Essigsäurealkohol) und Günther 

 (Salzsäurealkohol). Durch diese Thatsachen lassen sich widersprechende 

 Angaben von verschiedenen Autoren über Färbbarkeit bezw. Nichtfärbbar- 

 keit von Bacterien nach Gram, z. B. für den Diphtheriebac (welcher sich 

 ganz gut nach Gram färbt), wohl erklären. 



Im Gegensatz zu Günther'' fasst Verf. die GRAM'sche Methode niclit als 

 ein Entfärbungs-, sondern als ein Färbungsverfahren auf, indem er den 

 Schwerpunkt des Verfahrens in der Jodbehandlung sieht. Die Jodirung 

 fasst er als eine Art Beizung auf, indem dadurch der Farbstoff in gewissen 

 Theilen des Präparates fixirt wird, und vergleicht dieselbe mit der Tannin- 

 wirkung bei der NicoLLE'schen Methylenblaumethode'^. Auch möchte Verf. 

 die GRAM'sche Methode nicht einmal so allgemein als Kernentfärbungsver- 

 fahren bezeichnen, da die Kerne oft den Farbstoff erst bei den stärker 

 wirkenden Differenzirungsmitteln (Säurezusatz) hergeben. 



Um nun neben den nach Gram färbbaren Bacterien auch die nach Gram 

 entfärbten zur Anschauung zu bringen, suchte er letztere mit einer passen- 

 den Bacterienfarbe in Contrastfärbung nachzufärben. Als Contrastfarbe 

 wählte er das Fuchsin* und zwar als Carbolfuchsin. Da letzteres aber 

 wegen seines Alkoholgehaltes den Verdacht einer nachträglichen Schädig- 

 ung der GRAM'schen Färbung nicht ganz abweisen Hess und da es 

 ausserdem leicht Farbstoffniederschläge giebt und rändert, so suchte er den 

 Alkoholgehalt zu vermeiden. Er ersetzte mit Erfolg den Alkohol durch 

 den weniger leicht flüchtigen dreiatomigen Alkohol-Glycerin. Das „Car- 

 bolglycerinfnchsin" wird wie folgt bereitet: In einer geräumigen Reib- 

 schale wird 1 g Fuchsin (Rosanilinchlorhydrat) mit 5 ccm flüssiger Carbol- 

 säure innig verrieben. Dazu werden unter beständigem Verreiben allmählich 

 50 ccm reines Glycerin und danach 100 ccm destill. Wasser zugesetzt. 

 Diese dunkelrothe Lösung zeigt auf der Oberfläche kein schillerndes Fuchsin- 

 häutchen, ist bereits unfiltrirt verwendbar und lässt sich beliebig mit destill. 

 Wasser zu klaren Lösungen verdünnen (am besten 1 : 10 Th. destill. Wassers). 

 Die verdünnte Lösung kann zur Tuberkelbac- Färbung (namentlich für 

 Schnitte, welche sie weniger angreift) verwandt werden, die unverdünnten 

 Lösungen sind zu Ausstrichpräparaten sehr gut; die Lösung 1:10 färbt 

 weniger leicht den Grund mit, z. B. bei Peptonwasserpräparaten. Auch 

 die verdünnten Lösungen sind haltbar. 



Um nun Ausstrichpräparate nach Gram mit Carbolglycerinfuchsin nach- 

 zufärben, verfährt Verf. wie folgt: Mit einer an der Spitze zu einem Spa- 



^) Hier wäre einzuschieben Entfärbung mit Acetonalkobol nachNicOLLE (vgl. 

 Jabresber. XI, 1895, p. 625). Ref. 



-) Einführung in das Studium der Bacteriologie. 4. Aufl. Leipzig 1895, Thieme. 



») Jabresber. Vm, 1892, p. 603. Ref. 



*) Ref. bedauert lebhaft, dass ihm der gleiche Vorschlag von Nicolle unbe- 

 kannt geblieben, da in dem überhaupt sehr mangelhaften Referat über die 

 NicoLLE'sche Arbeit, das ihm zunächst nur bekannt vrurde, gerade dieser Vor- 

 schlag vollkommen unerwähnt blieb. Ref. 



