116 Milzbrandbacillus. Anaerobe Züchtung. 



NEB'sche Röhren. In diese that er mit sporenlosem Mzb.-Material (Mäuse- 

 blut, Mäusemilz) beschickte Agarröhrchen und fand, dass nach zweitägi- 

 gem Verweilen derselben im Brutschrank sich Mzb.-Culturen mit massen- 

 haften Sporen gebildet hatten. Der Nachweis der Sporen wurde nicht 

 nur durch die mikroskopische Untersuchung, sondern auch dadurch erbracht, 

 dass ein Partikelchen der gewachsenen Culturen in sterilem Wasser aufge- 

 schwemmt, diese Aufschwemmung 10 Minuten lang einer Temperatur von 

 80° im Wasserbad ausgesetzt und dann über eine A garplatte oder ein 

 schräg erstarrtes Agarröhrchen ausgegossen wurde. Nun wuchsen auf den 

 Platten und Röhrchen Mzb.-Colonien und konnten dieselben natürlich nur 

 den vorhandenen, gedachten Temperaturen gegenüber resistenten Sporen 

 entwachsen sein. Verf. trachtete dem Einwände, dass seine Versuche nicht 

 vollständig anaerob angestellt wurden, durch die Vorsieh tsmaassregeln : Ab- 

 dichten des Gummistopfens der BucHNEE'schen Röhren, Erhöhung der 

 Quantitäten der sauerstoffabsorbirenden Reagentien, Auspumpen der Luft 

 aus dem Agarnährboden, zu begegnen. Auch überzeugte er sich davon, dass 

 unter den gebrauchten Maassregeln die BucHNER'schen Röhren wirklich 

 nur Stickstoifatmosphäre enthielten und er glaubte somit sicher zu sein, dass 

 die Sporenbildung unter Abwesenheit von Sauerstoff zu Stande gekommen 

 ist. Auch dem Einwände, dass Sporen gebildet wurden, ehe der Sauerstoff 

 völlig resorbirt worden ist, begegnete K. dadurch, dass er die frisch geimpf- 

 ten Röhrchen in BucHNER'schen Röhren 10-12 Stunden in den Eisschrank 

 stellte, so dass, da in dieser Zeit bei gegebener Temperatur Sporen nicht 

 auswachsen konnten, inzwischen bestimmt aller Sauerstoff resorbirt wurde 

 und daraufhin erst die Sporen also in Sauerstoff- freier Atmosphäre sich ent- 

 wickeln mussten. K. verwendete dann anderes Nährmaterial, auf dem auch 

 unter gewöhnlichen Verhältnissen Mzbc. gedeihen und beobachtete, dass 

 auf demselben unter anaeroben Verhältnissen ebenfalls Sporenbildung zu 

 Stande kam. Auch dann, wenn viele bis zu 15 Generationen von einem 

 Stamme aus in BucHNER'schen Röhren auf Agar oder Agar + 3 Tropfen 

 einer 2 proc. Natrium -sulfurosum- Lösung fortgezüchtet wurden, konnte in 

 allen Generationen Sporenbildung beobachtet werden; daher bei fortge- 

 setzter Züchtung in BucHNEE'schen Röhren von einer Abschwächung nicht 

 die Rede sein konnte. Was nun den Zeitpunkt des Beginnes der Sporen- 

 bildung betrifft, so erscheint die letztere in den BucHNEE'schen Röhren 

 etwas verlangsamt gegenüber der bei aerober Züchtung. K. erzielte auch 

 Sporenbildung, wenn er sporenloses Mzb.-Material auf Agarplatten aus- 

 säete, die er in geeigneter Weise in einem Exsicator solchen Verhältnissen 

 aussetzte, wie die Agarröhrchen in den BucHNER'schen Röhren. Sonach 

 dürfte erwiesen worden sein, dass, entgegen der allgemeinen Anschauung, 

 zum Zustandekommen der Sporenbildung bei Mzb. nicht die Anwesenheit 

 von Sauerstoff erforderlich ist, dass dieselbe vielmehr auch unter anaeroben 

 Verhältnissen in einer Stickstoffätmosphäre regelmässig einzutreten pflegt. 

 Dann wurde jene Methode anaerober Züchtung in Anwendung gezogen, die 

 durch Einleitung von Wasserstoff entweder in geimpfte Reagensröhrchen, die 

 dann abgeschmolzen werden, oder in den BoxKiN'schen Apparat geübt wird. 



