658 Allgemeine Methodik. Mikroskopische Züchtungsmethode 



der Bacterien. 



lebende Tuberkelbac, Typhusbac., Choleravibrionen, Staphylok., während 

 einige Fermente (Diastase, Emulsin, Pankreatin, Papaj r otin, Pepsin, In- 

 vertin, sowie Diphtherie - Tetanus - Staphylok. - Toxin) keine Reduction 

 zeigten. Ebenso lasse sich der Keimgehalt verschiedener Milchproben ver- 

 gleichsweise genügend genau bestimmen, indem man abgestufte Mengen 

 Milch mit Methylenblau gefärbt und mit Paraffin, liquidum überschichtet 

 in den Brutschrank stellt. Die Methode verlangt Controle durch ungeschä- 

 digte Controlproben und muss jedes Object auf Brauchbarkeit geprüft 

 werden. Vielleicht giebt es Zellen, welche ohne Rücksicht auf Leben oder 

 Absterben reducirende Stoffe enthalten. Vielleicht könnte die Methode 

 auch zum Nachweis von unbekannten Lebewesen verwerthbar sein. 



Czaplewski. 



Klein (1787) färbt dieBacterien und zählt sie mikroskopisch. 

 Er mischt ein Quantum z. B. 0,5 ccm einer flüssigen Bacteriencultur oder 

 Suspension einer festen Cultur in physiologischer Kochsalzlösung mit der 

 gleichen Menge EHELicH'schen Anilingentianavioletts mit der Platinöse. 

 Färbung in 2-3 Minuten. Nach gehörigem Umrühren wird mit geaichter 

 Platinöse eine Probe auf vollständig fettfreiem Deckglas gleichmässig an- 

 gestrichen. Das lufttrockene Deckglas wird durch l-2maliges Durchziehen 

 durch die Flamme fixirt in neutralem Canadabalsam eingeschlossen. Meist 

 genügt Durchzählen von 50 Gesichtsfeldern (etwa 15-20 Minuten Dauer), 

 eventuell unter Zuhülfenahme eines Ocularnetzmikrometers. Unter Berück- 

 sichtigung der Grösse der Platinöse, des Deckglases und des Gesichtsfeldes 

 lässt sich die Menge pro 1 ccm berechnen. Verf. stellt genauere Angaben 

 über die Fehlergrenzen und Anwendbarkeit der Methode in Aussicht. 



Cxaplewski. 



Hebewerth (1782) beschreibt die mikroskopische Zählungs- 

 methode der Bacterien von Alex. Klein, welche darin besteht, dass 

 in einem Uhrglase einer bestimmten Quantität einer flüssigen Cultur oder 

 einer Emulsion einer Cultur ein gleiches Quantum Anilinwassergentiana- 

 violett zugesetzt und nach tüchtigem Umrühren zur gleichmässigen Ver- 

 theilung der Bacterien, mittels einer geaichten Platinöse ein bestimmtes 

 Quantum des Gemisches auf einem fettfreien Deckgläschen über die ganze 

 Oberfläche gleichmässig ausgestrichen wird. Im getrockneten, in Xylol- 

 canadabalsam eingeschlossenen Präparat werden 50 Gesichtsfelder gezählt 

 und nun lässt sich durch Berechnung mit Berücksichtigung der Grösse der 

 Platinöse sowie des Deckgläschens und des Gesichtsfeldes die Bacterienzahl 

 bestimmen, welche sich in 1 ccm der Cultur oder der Emulsion vorfand. 



H. benutzte Leitz Ocul. 4, Obj. 1 / i2 Oelimmers. Apert. 1,30, Tubuslänge 

 160 mm, 2 r des Gesichtsfeldes = 0,15 mm. Wurde nun eine Platinöse 

 benutzt, welche eine Capacität hatte von 1,5 mg, ein Deckgläschen von 

 2 r = 15 mm und befanden sich in 50 Gesichtsfeldern 500 Bacterien, so 

 enthielt 1 ccm der Cultur oder Emulsion: 



4^- X 10,000 X -^5. X 2 Bacterien. 

 50 1,5 



Die sorgfältige Vergleichung mit dem KocH'schen Plattenverfahren er- 



