Physiologie der Zeugung. 837 



Im weiteren Verfolg seiner Untersuchungen isolierte er auch aus dem 

 Sperma die membranerzeugende Substanz. 



Schon früher waren zahlreiche Versuche gemacht worden, die Be- 

 fruchtungssubstanz aus dem Sperma zu gewinnen. Zuerst hat 

 Winkler (215) den Extrakt von Spermatozoen von Sphaerechinus 

 und Arbacia präpariert, indem er das Sperma mit destilliertem Wasser 

 behandelte , sodann mehrmals filtrierte und die Konzentration durch 

 Zusatz von eingedampftem Seewasser wieder regulierte. Die Be- 

 fruchtungsmembran trat hier aber nicht auf, sondern es konnten nur 

 die ersten Furchungsstadien konstatiert werden. Jedoch sind diese 

 Versuchsresultate nicht vollständig einwandfrei, da man nicht ganz 

 sicher sein kann , ob die Furchung nicht etwa durch Konzen- 

 trationsveränderung des Seewassers veranlaßt wurde (vgl. J. Loeb, 

 149, p. 194). 



KuPELWiESER (106) tötete das Sperma von Mytilus, Chiton, 

 Asterias, Strongylocentrotus durch Erhitzen auf 70 — 100 '^ und filtrierte 

 es sodann. Mit diesem Filtrat gelang es ihm, die Dottermembran 

 an den Eiern der Echiniden hervorzurufen, allerdings nur bei jedem 

 fünften Weibchen. 



J, Loeb (149, p. 196), in dessen Laboratorium diese Arbeit aus- 

 geführt wurde, vermutet, „daß die Membranbildung in den Versuchen 

 Kupelwiesers mit artfremdem Sperma durch das dem Samen bei- 

 gemischte Serum bedingt war". Die Wiederholung dieser Experimente 

 von Kupelwieser ist Loeb nicht gelungen. 



In seinen Versuchen schlug T. B. Robertson (187, 190) einen 

 anderen Weg ein : Er ging von der Beobachtung aus, daß die größten 

 Schwierigkeiten bei der Erhaltung der entwicklungserregenden Sub- 

 stanz durch das Seewasser verursacht werden. Sogar in starker Ver- 

 dünnung verhindert das Seewasser die Extraktion aus dem Sperma 

 der membranbildenden Substanz. Das Prinzip der RoBERTSONschen 

 Methode ^) bestand im genauen Auswaschen der Spermatozoen in 

 destilliertem Wasser, in der Präzipitation der membranerzeugenden 

 Substanz durch BaCL,, der Lösung derselben in HCl 2) und Reprä- 

 zipitation durch Azeton. Diese Substanz hat die Eigenschaft, die 

 Membran an den Echinideneiern hervorzurufen, dieselben zu aggluti- 

 nieren, resp. die Cytolyse der Eier zu veranlassen. Robertson be- 

 trachtet diese Substanz als identisch mit Oocytin. 



Ich muß hier wieder bemerken, daß die RoBERTSONsche Be- 

 zeichnung dieses Stoffes als „fertilizing agent" nicht richtig ist. In 

 keinem F'all gelang es Robertson, die Entwicklung der Eier durch 

 Behandlung mit diesem Stofif auszulösen, sondern im besten Fall nur 

 die Bildung der Membran an den Eiern hervorzurufen. Aber gerade 

 dieser Umstand bildet für mich den Beweis, daß noch ein anderer, 

 zur normalen Entwicklung unumgänglich nötiger Stoff in den Sper- 

 matozoen enthalten sein muß. Dieser Stoff, welcher also gewiß nicht 

 Oocytin ist, wird die angeregten Oxydationen regulieren und bildet 

 ein wesentliches Moment des Befruchtungsprozesses. Wie bei der 

 künstlichen Parthenogenese die hypertonischen Lösungen, so wird dieser 

 Stoff einen solchen Einfluß auf das in Entwicklung begriffene Ei aus- 



1) Robertson scheint die Arbeit von Winkler nicht gekannt zu haben. 



2) Ein Teil der durch BaClg präzipitierten Substanz hat sich nicht in HCl, 

 sondern in KOH gelöst; diese Bubstanz blieb jedoch den Eiern gegenüber wir- 

 kungslos. 



