DES POISSONS OSSEUX 5 



procédé, qui réiissiL très bien pour les preuiiers stades du dcvo- 

 loppenienl, n'esl pas aussi bon lorsque l'embryon est assez 

 avancé : dans ce cas, en effet, l'acide osmiquc ne le pénètre pas 

 suffisamment. Sa surface seule est bien fixée. L'acide osmique 

 est excellent pour bien mettre en évidence la réflexion des bords 

 du blastoderme et les limites de chaque feuillet. 



Le second procédé est celui qui donne les meilleurs résultats 

 et que j'ai presque constamment employé. L'œuf est plongé 

 pendant une dizaine de minutes dans le liquide de Kleinenberg 

 additionné de 10 pour 100 d'acide acétique cristallisable. Puis 

 il est ouvert dans de l'eau renfermant 10 pour 100 d'acide acé- 

 tique, liquide dans lequel le vitellus est soluble, et on extrait 

 l'embryon. Celui-ci est mis ensuite pendant quelques heures 

 dans le liquide de Kleinenberg pur, puis dans l'alcool à GO*', 

 -75°, 90° et finalement dans l'alcool absolu. Cette méthode con- 

 serve aux éléments toute leur intégrité, elle n'amène aucune 

 altération dans la forme de l'embryon. Dans toutes mes prépa- 

 rations j'ai trouvé toutes les figures cytodiérétiques intactes, 

 tandis qu'avec les autres procédés elles sont laplupart du temps 

 -altérées. 



L'embryon durci et déshydraté par l'alcool absolu est inclus 

 dans le collodion ou dans la paraffine, d'après les méthodes 

 ordinaires, et coupé soit avec le microtome de Jung, soit avec le 

 microtome à bascule de Cambridge. L'embryon peut être coloré 

 en masse, avant l'inclusion, soit par le carmin borate alcoolique, 

 soit par le carmin aluné acide, soit par l'hématoxyline. On 

 obtient ainsi de très belles préparations en colorant les coupes, 

 préalablement fixées au porte-objet, par les couleurs d'aniline, 

 la safranine, ou le violet de gentiane par la méthode de Bizzoz- 

 zero. 



Pour l'étude des formes extérieures, les œufs durcis par 

 l'acide chromique et dépouillés de leur capsule, sont ceux qui 

 conviennent le mieux. J'ai fait également pour les différents 

 stades des préparations de germes et d'embryons entiers, déta- 

 chés avec soin du vitellus et montés dans le baume, après colo- 

 ration au carmin. Ces préparations sont indispensables parce 

 qu'elles montrent des détails qui échappent sur les coupes, et 

 qui sont absolument invisibles lorsqu'on se contente d'exami- 

 ner à la lumière directe les embryons durcis. J'ajouterai que 



