32 W. Biedermann, 



Natriumnitrit (Na. nitros. puriss. Merck) 1 g 



Kaliumphosphat 0,5 „ 



MgSO, 0,3 „ 



Na,CO, 0,5 „ 



NaCl .' 0,5 „ 



Aq. destill 1 Liter 



oder mit Nitrit-Agar als festem Nährboden in folgender Mischung: 

 Natr. nitros. puriss. 2 g 

 Soda (wasserfrei) 1 „ 

 Kaliumphosphat Messerspitze 

 Agar-Agar 15 g 



Flußwasser 1 Liter 



vornahm. „Beimpfte man eine solche Lösung mit Erde, so wurde schon nach 

 einigen Tagen eine Nitritoxydation bemerkbar, und nach etwa 2 Wochen war das 

 Nitrit verschwunden. Machte man davon Ueberirapfungen in eine frische Lö- 

 sung gleicher Zusammensetzung , so war meist schon in der 2. Generation d i e 

 Fähigkeit, NH3 zu oxydieren, verloren. Denn beimpfte man davon reich- 

 hch die gewöhnliche Ammonlösung, so blieb regelmäßig jede Nitrifikation aus" 

 (Wixogradsky). Daß die Nitratation in ammoniakalischeu Nährlösungen erst be- 

 ginnt, wenn die Nitritation ganz beendet ist, und bei immer erneutem Zusatz von 

 Ammoniak überhaupt nicht beginnt, erklärt sich leicht aus dem Umstände, daß 

 Ammonsalze auf die Entwicklung des Nitratationserregers hemmend wirken. 



Unzweifelhaft gibt es eine ganze Anzahl nahe verwandter, aber doch morpho- 

 logisch unterscheidbarer Nitritbildner, deren Isolierung Winogradsky mit Er- 

 folg versuchte und zwar teils unter Anwendung flüssiger, teils fester Nährböden. 



Als eines sehr geeigneten festen Nährbodens bediente er sich, da organische 

 Substanzen (Gelatine) von vornherein ausgeschlossen waren, der von Kühne seiner- 

 zeit vorgeschlagenen Kieselsäuregallerte. Dem Prinzipe nach wird eine durch 

 Dialysieren eines Gemisches von Wasserglas (K- oder Na-Wasserglas) und HCl 

 erhaltene wässerige Kieselsäurelösung verwendet. Um daraus einen festen Mähr- 

 boden für den Nitritbildner zu gewinnen, sind folgende 4 Flüssigkeiten erforderlich : 



L II. III. IV. 



Ammon. sulfur. 3 g FeSO^ 2-proz. Lösung Kochsalzlösung Magnesiamilch 

 KjHPO^ 1 ,, gesättigt (Aufschwemmung 



MgSO, 0,5 „ von MgCOg) 



Aq. destill. 100 „ 



50 ccm der Kieselsäurelösung werden in einem Kölbchen mit 2,5 ccm der 

 I. und 1 ccm der II. Lösung versetzt. Von III wird nur ein kleiner Tropfen ganz 

 zuletzt in jede fertig gegossene Platte gebracht. Ueber die Herstellung von Kiesel- 

 platten vergl. besonders Beijerinck (7, p. 38). Mg-Milch setzt man so viel zu, daß 

 das Gemisch ein milchiges Aussehen bekommt. Zur Beimpfung wird der Kiesel- 

 säurelösung zugleich mit den Salzen eine Oese voll einer guten Zucht des Nitrit- 

 bildners beigemischt. Bequemer als die Kieselsäuregallerte erwies sich als fester 

 Nährboden Nitrit-Agar. 



Zur Reinzuchl. der Nitratationsbakterien benutzte Winogkadsky die oben 

 erwähnte Nitri tuährlösung oder das Nitrit-Agar. 



Auf geeigneten Nährböden bildete der Ni tratbildner {Nttrobactn; Kitromona-s) 

 mikroskopisch kleine, völlig einförmige Kolonien, die unregelmäßig rundlich, sehr 

 scharf konturiert, sehr stark lichtbrechend und farblos erschienen, in enormer Zahl, 

 Das Wachstum war immer äußerst langsam. Während der ersten Woche sieht 



