Die Aufnahme, Verarbeitung und Assimilation der Nahrung. 231 



Da die Fortschaffung der gelösten Massen ohne Zweifel den Fortgang der 

 Verflüssigung wesentlich begünstigt, so hat man wohl auch, statt die Enzymlösung 

 auf die Gelatine zu schichten, die letztere von oben her mit jener in Berührung 

 gebracht, und hat Fuhrmakn hierfür ein sehr praktisches Verfahren angegeben. 



Endlich kann man wohl auch die zu prüfende Lösung von kleinen Stückchen 

 Bimsstein oder Filtrierpapier aufsaugen lassen und diese dann auf die Oberfläche 

 einer gegossenen Gelatineplatte legen. Dem Gehalt an Proteasen entsprechend, wird 

 unter demselben eine mehr oder minder große ]\Ienge von Gelatine verflüssigt. Die 

 Empfindlichkeit aller der genannten Methoden nimmt mit der Konzentration der 

 Gelatine ab und kann noch gesteigert werden durch einen geringen (etwa 1-proz.) 

 Zusatz von Soda. Uebersteigt die Temperatur, bei welcher die Untersuchung vor- 

 genommen wird, nicht 20" C, so genügt im allgemeinen eine 5-proz. Gelatine. Da, 

 wie schon erwähnt wurde, Enzyme leicht durch Adsorption an festen Partikeln 

 haften, versuchte Fermi die Empfindlichkeit seiner Methoden noch dadurch zu 

 steigern, daß er den zu prüfenden Lösungen verschiedene unlösliche Pulver bei- 

 mischte (Eisen, Antimon, Zink, Schwefel, Eisenoxydhydrat, Zinkoxyd, bas. Wis- 

 mutnitrat, Mg-Karbonat, MgO, CaCOg, Berlinerblau, Stärke, Knochenkohle etc.) 



In der Tierphysiologie hat man bei Untersuchung der proteolyti- 

 schen Wirkung von Verdauun-gssäften von den Gelatinemethoden bis- 

 her kaum Gebrauch gemacht und bevorzugt noch immer als Reagens 

 das Blutfibrin, welches vielleicht nur den einen Vorzug hat, daß 

 es die Untersuchung auch bei höheren Temperaturgraden ermöglicht. 

 Um die Lösung der Fibrinflockeu deutlicher sichtbar zu machen, hat 

 man nach dem Vorgange Grützners durch Karmin gefärbtes Fibrin 

 verwendet. Auch Alka Halb uminate (Eiereiweiß mit Ammoniak), 

 sowie erstarrtes Blutserum fanden mit Erfolg Anwendung zum 

 Nachweis von Proteasen ; doch sind sie im allgemeinen weniger em- 

 pfindlich, als Fibrin. Am allerungünstigsten für die Untersuchung der 

 Bakterienenzyme erwies sich das koagulierte Eier ei weiß, wel- 

 ches neuerdings vielfach in der Form METTscher Röhrchen verwendet 

 "wird. 



Das außerordentliche Uebergewicht der Gelatine in bezug auf 

 Empfindlichkeit gegen Proteasen (Trypsin) geht sehr deutlich aus der 

 von Fermi mitgeteilten Vergleichstabelle hervor. (Tabelle in Fuhr- 

 mann, Vorlesungen, p. 29.) 



Auch physikalische, besonders optische Methoden hat- 

 man in neuerer Zeit mehrfach zur Untersuchung proteolytischer En- 

 zyme benützt, indem einerseits das Drehungs ver m ögen der ge- 

 bildeten, optisch-aktiven Peptone (Literatur Fuhrmann, 1. c. p. 31), 

 andererseits auch die mittels des PuLFRiCHschen Refraktometers 

 zu beobachtenden Aen dem n gen des Brechungsindex als Maß 

 für die Menge der gebildeten Peptone gelten können. 



Für genaue quantitative Bestimmungen empfiehlt es sich, Fibrin 

 oder koaguliertes Eiereiweiß als Prüfungsobjekt zu wählen und die 

 Menge des gelösten N zu bestimmen (Lafars Handb., Bd. 3, p. 123). 



Die Zahl der Bakterien, welche Proteasen bilden und als ty- 

 pische „V e r d a u u n g s s e k r e t e" nach außen abscheiden, ist eine sehr 

 große, und man erkennt dies in der Regel sofort daran, daß die Gelatine 

 bei Stichkulturen sehr bald verflüssigt wird. Fermi (82, 83) fand 

 derartige Enzyme bei Bac. suhtilis, anthracis. megatherium, prodigiosiis 

 pyocyaneus, Vibrio cliolerae, V. FinJder- Prior, V. Deneki, V. Metsch- 



