Die Aufnahme, "Verarbeitung und Assimilation der Nahrung. 375 



kiiltiiren einer aus Gartenerde gezüchteten Amöbenart mit bestimmten 

 ihr zur Nahrung dienenden Bakterien, inbesondere B. coli auf festem 

 Nährboden (Gelatine) herstellte, und so in den Stand gesetzt war, 

 durch geeignetes Verfahren relativ große Mengen reinen (d. h. nur 

 mit einer Bakterienart vermischten) Amöbenmaterials sich zu ver- 

 schaffen. 



Es wurden zu diesem Zwecke große, flache Schalen, wie sie zur Zucht von 

 Tuberkelbacillen im großen verwendet werden, mit einem Gemisch von 100 ccm 

 Bouillon, 900 ccm Wasser und 10 g Gelatine beschickt, nachdem die Mischung 

 leicht alkalisch gemacht wai*. 



Nach Beimpfung mit einer vorbereiteten Amöben-Bakterienkultur erscheint im 

 Verlauf von etwa einer Woche die ganze Oberfläche gleichmäßig mit beweglichen 

 Amöben und Bakterien überzogen. In diesem Stadium der Entwicklung lassen sich 

 dieselben durch vorsichtiges Abspülen mit Wasser als Emulsion gewinnen und durch 

 darauffolgendes Zentrifugieren als weißes Sediment sammeln, welches durch wieder- 

 holtes Zentrifugieren von den beigemischten Bakterien ziemlich befreit werden kann. 

 Eine einzige Schale liefert etwa 74 ccm Amöbensediment, und es bedarf oft der Ver- 

 arbeitung von mehr als 20 Kulturschalen, um eine genügende Menge von Enzym 

 zu gewinnen. Mouton extrahierte dasselbe mit Glyzerin (2—3 ccm auf 1 ccm 

 Amöbensediment) und verwendete hierauf eine wässerige Lösung des Alkoholnieder- 

 schlages. Bei Vermischung von etwa 10 ccm des Extraktes mit 50 ccm 90-proz. 

 Alkohols entsteht ein reichlicher flockiger Niederschlag, welcher durch Zentrifugieren 

 als zusammenhängende Masse gewonnen werden kann. Längeres Stehen unter Al- 

 kohol ist möglichst zu vermeiden, und es wird daher nach raschem Dekantieren 

 sofort in Wasser gelöst. Die leicht getrübte Flüssigkeit, welche man auf diese Weise 

 erhält, zeigt bei mikroskopischer Untersuchung außer toten Amöbenkörpern noch 

 eine erhebliche Anzahl abgestorbener Bakterien, welche mitteis Zentrifugieren s und 

 mehrfacher Filtration durch Papier teilweise entfernt werden können. Die immer 

 noch etwas getrübte, bakterienhaltige Lösung wird nach mehrstündigem Stehen 

 völlig klar. Anstatt zunächst mit Glyzerin zu extrahieren, kann man auch das 

 durch Zentrifugieren gewonnene Amöbensediment direkt in Wasser oder physio- 

 logischer Kochsalzlösung aufschwemmen und erhält so nach Zusatz von etwas 

 Chloroform, wodurch die Amöben abgetötet werden, eine Flüssigkeit von gleicher 

 verdauender Wirkung. 



Man sieht leicht, daß in beiden Fällen wohl der berechtigte Ein- 

 wand gemacht werden könnte, es seien die zu beobachtenden Enzym- 

 wirkungen der Lösung nicht sowohl den Amöben, als vielmehr den 

 immer mitverarbeiteten Bakterien zuzuschreiben, und es erscheint 

 daher sehr wesentlich, bei der Auswahl der mitgezüchteten Bakterieu- 

 art auf diesen Punkt Rücksicht zu nehmen. Von Bact. coli ist es nun 

 bekannt, daß es kaum proteolytische Enzyme bildet und jedenfalls 

 Gelatine nicht verflüssigt, während dagegen B. anthracis oder Cholera- 

 bacillen lebhaft Erscheinungen der Eiweißverdauung darbieten und 

 durch Autolyse leicht zerfallen. 



Schon Beijerinck (6) war es bei seinen Kulturversuchen von 

 Amoeha zymophUa aufgefallen, daß die auf Gelatine gemeinsam mit 

 Hefepilzen oder Essigbakterien gezüchteten Amöben eine lebhafte 

 Verflüssigung des Substrates bewirkten, die er auf Sekretion einer 

 Protease seitens der Amöben bezog, da weder die Hefezellen noch 

 die Bakterien für sich allein eine solche Wirkung zeigten. Es handelte 

 sich somit unzweifelhaft um einen extracellularen Verdauungs- 

 vorgang, wie er bis dahin bei Amöben nicht beobachtet worden war. 



