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Flamme und trägt, unter Verwendung einer engen Platinöse, auf dessen 



eine Seite recht gleichmäßig eine ca. 0,2 mm dicke Schichte der beimpften 



Gelatine derart auf, daß ringsum ein mehrere Millimeter breiter Rand 



frei bleibt. Das Deckglas wird dann auf den mit Vaseline be- 

 sstrichenen Ring (c) einer vorbereiteten, sterilisierten BöTTCHER'schen 



Kammer {Fig. 52) aufgedrückt, auf deren Boden man zuvor ein winziges 



Tröpfchen sterilen Wassers {d) 



ausgebreitet hatte. Horizontale '^^ i ,, — ■ iY 



Lage der feuchten Kammer auf ^ ^ 



10 einer geeigneten Unterlage und ..''' 



mittlere Zimmertemperatur (15") ^ ■ — I U^=~ :r:^^ l , ^ 



vorausgesetzt, wird die (nach 



innen gekehrte) Gelatine-Schichte . ^^9- 52 Böttcher' sehe Kam m e r 



n-.\ \^^^r^ ^.i^w.i.,.,^!',-™ „r,-*- ^,, im senkrechten Schnitt. Etwas verkleinert. 



(0) bald gleichmäßig erstarren. ^^^-^ Hansen. 



15 Anstatt solcher Kammer kann 

 man sich auch eines hohl geschliffenen Objektträgers bedienen. Es 

 empfiehlt sich, nicht bloß eine sondern mehrere derartige Plattenzuchten 

 anzulegen. Sobald die Schichte fest geworden ist. bringt man die Kammer 

 unter das Mikroskop. Sehr bequem ist dazu ein solches, welches durch 



20 einen angebrachten Revolver eine rasche Umwechslung der zwei hierfür 

 erforderlichen Objektive von verschieden starker Vergrößerung (z. B. von 

 Zeiss die Nummein A und D) erlaubt. IVIit der schwächeren (ca. 40 bis 

 60-fach) durchsucht man nun systematisch die Gelatine-Schichte Stelle 

 für Stelle nach geeigneten Zellen, welche einzeln sind und von allen 



25 Nachbarn ferne genug liegen. Man vergewissert sich dessen unter vor- 

 übergehender Anwendung der stärkeren (ca. 250— 400-fachen) Vergröße- 

 rung und stellt die Lage einer solchen ausgewählten Zelle dann fest. 

 Die verschiedenen Kunstgriffe und Hilfsmittel, welche dazu, also zur 

 Feststellung der Lage der Zellen bei der Kinzellkultur. in Anwendung 



30 kommen, hat H. Will (1) auf Grund seiner reichen Erfahrung einer 

 kritischen Besprechung unterzogen. Als einfachste und bequemste Art 

 und insbesondere für Anfänger lange nicht so heikel wie die Anwendung 

 des sog. Objektmarkierers hat sich mir die direkte Bezeichnung 

 bewährt, so ausgeführt, daß man die Zelle unter Anwendung der schwachen 



35 Vergrößerung (mit ca. 1 cm Objektabstand) zwischen zwei feine Tinten- 

 punkte oder besser noch Schwarzlack-Punkte einschließt, welche man mit 

 Hilfe einer feinen, dünnen Zeichenfeder oder eines zugespitzten Impf- 

 häkchens auf die Oberseite des Deckgläschens aufsetzt. Man vei'sucht, 

 auf diese Weise ungefähr ein halbes Dutzend oder noch mehr Zellen zu 



40 „markieren". Dies ist nötig, denn nicht selten bleibt bei der einen oder 

 der anderen Zelle die Vermehrung aus, sei es, weil sie zu Versuchs- 

 beginn schon tot Avar, oder weil sie nicht kräftig genug war, um sich 

 in dem gelatinereichen (10-proz.) Nährboden entwickeln zu können. Das 

 Absuchen ist selbst für den Geübten ein recht ermüdendes Geschäft. Es 



45 wird wesentlich erleichtert, wenn man nicht gewöhnliche sondern solche 

 Deckgläser verwendet hat, welche nach Will's Vorschlag eine einge- 

 ätzte Teilung in Quadrate (von ca. 2 mm Seitenlänge) tragen, die allen- 

 falls auch, wie Alfred Jörüensen empfohlen hat, noch durch ein- 

 geätzte Ziffern numerirt sind. Dies ist auch aus dem Grunde sehr zu 



50 empfehlen, weil dadurch das Notieren der über die Zellen gemachten 

 Beobachtungen im Tagebuche wesentlich vereinfacht wird. Sobald man 

 die Markierung abgeschlossen hat, legt man die BöTTCHER'schen Kammern 

 in eine größere Doppelschale und beläßt sie durch ca. 20 Stunden im 



