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Si rélimination de l'oxygène n'a pas été complete, mais suffisante cependant pour 

 que la croissance fut possible, il se forme, comme je l'ai dit, des coionies simplement 

 constituces par des batonnets ou des filaments, qu'il faut doiic considcrer comme la 

 forme »a oxygène« du ferment butylique. Ces organismes se colorent en jaune par 

 l'iode et donnent absolument Timpression d'une autre espèce de bactéries. Comme nous 

 rencontrerons de nouveau la même forme plus loin, a propos de la »fermentation prin- 

 cipale», nous pouvons la passer provisoirement sous silence. 



Te ferai remarquer que l'addition d'un peu d'empois d'amidon ou d'amidon soluble 

 au mout gelatine permet de dcmontrer directement et d'une maniere extrémement 

 caractéristique la formation de l'amylase butylique. Autour de chaque colonie en efïet 

 prend naissance une aire de difïusion '), dans laquelle la diastase a détruit l'amidon, 

 de maniere que l'iode ne peut plus y faire apparaitre Ia teinte caractéristique. Si donc 

 on verse une solution d'iode sur une plaque de mout gelatine renfermant des coionies 

 du ferment butylique, les champs de diffusion de l'amylase tout autour des coionies ne 

 se colorent pas, tandis que la gelatine amidonnce prend une teinte noir bleuatre. Sauf 

 les embryons de Graminées, qui occupent Ie premier rang au point de vue de la pro- 

 duction de fortes quantités d'amylase, je ne connais jusqu'ici pas d'organismes qui 

 puissent se mesurer aux coionies du ferment butylique a l'égard de l'intensité de cette 

 excrétion. Je ne pus observer de diffcrence sensible entre les clostridiums et la forme 

 aérobie dans la quantité d'amylase produite. 



Il va de soi qu'une culture anaérobie du ferment peut être faite encore de bien 

 d'autres maiiières. Des chambres de verre tout a fait remplies par exemple sont très- 

 simples et très-pratiques; on pourra en employer qui se composent d'un anneau de 

 verre ferme des deux cótés par une plaque de verre poli. Il faut cependant tenir 

 compte de la couche d'air adhérant aux plaques et prendre en conséquence un épais 

 anneau, c'est-a-dire qu'on opérera avec une plaque de gelatine large et épaisse, mesu- 

 rant par exemple 50 cm ^ sur 3 mm. d'épaisseur. Il faut aussi que les plaques de verre 

 soient serrées au moyen de vis sur l'anneau, sinon l'air a encore acces. Ce qui rend 

 cette disposition imparfaite, c'est que si l'on ouvre la chambre, au moment oü les co- 

 ionies doivent être examinées, la gelatine reste adhérer en partie au couvercle. Quand 

 on remet celui-ci en place, des buUes d'air et Ie plus souvent aussi des spores de 

 moississures out eu Ie temps de pénctrer, et l'expérience doit donc prendre fin quand 

 la chambre humide a etc une fois ouverte. 



Ces désagréments s'attachent encore au procédé généralement connu et d'ailleurs 

 excellent de L i b o r i u s ^). Ün cultix e d'après cette methode en gelatine nutritive, 

 •que l'on stérilise simplement dans des éprouvettes, qu'on rend ensuite exempte d'oxy- 

 gène par rébulliti<in"), qu'on ensemence et qu'on laisse se solidifier. Dans les couches 

 profondes du tube, oü l'oxygène ne peut pénétrer, se forment les coionies, auxquelles 

 on se fraie acces au moyen d'un trait de lime dans la paroi du tube. Les cultures 

 butyliques, préparées par ce procédé en mout gelatine, niontrent une couche super- 



') On trouve souvent rapporto que »la diastaso« n'est pas difïusible. C'est une 

 errcur; les différentes formes d'amylase diffusent avec la niênie vitcssc cnviron que les 

 peptones, et traversent avec facilité les menibranes organiqucs. 



') Zeitschr. f. Hygiëne, Bd. I, p. 161, 1886. 



•) II n'est pas nécessaire de faire passer de riiydrunéiie dans la gelatine. Cette 

 opération est même a déconsciller a causc de la production d'écunic. 



