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fcielle de deux a trois centimètres d'épaisseur, dans laquelle, par suite de la présence 

 d'oxygène, des colonies ne peuvent prendre naissance. Au-dessous de cette couchc Ie 

 dtveloppement est régulier. Les colonies supérieures, que l'oxygène atteint au bout 

 d'une couple de jours en se diffusant dans la gelatine, continuent cependant de croitre ; 

 si bien que même après plusieurs semaines on ne trouve aucune différence de volume 

 entre les colonies voisines de la surface et celles situées dans les profondeurs du tube. 

 Ces colonies sont toutefois constituées a la périphérie par la forme dite »a oxygcne« 

 (fig. 6); au centre se rencontre la forme en clostridium du ferment (fig. 8). 



Si je ne puis recommander en première ligne la methode de L i b o r i u s pour 

 la culture pure, je ne puis cependant négliger de faire ressortir a ce propos l'impor- 

 tance de ce prodédé a d'autres points de vue. Voici ce que j'en dirai. 



Si l'expérience a été bien faite, la longue colonne de gelatine dans l'éprouvette, 

 que l'on vient de fermer par un tampon d'ouate, présente de haut en bas tous les degrés 

 de saturation par Toxygéne. Un simple coup d'oeil suffit donc, avec une culture quel- 

 conque de microbes, pourvu que l'on ait distribué ceux-ci d'une maniere suPl'isamment 

 serrée dans la gelatine, pour reconnaitre si l'on a affaire a l'anaérobiose facultative 

 OU obligatoire. On pourra même, si la nutrition peut s'opérer dans des conditions 

 favorables, reconnaitre l'anaérobiose temporaire,généralement moins apparente, (comme 

 p. ex. chez la levüre alcoolique) et la distinguer nettement de l'anaérobiose facultative. 



La gelatine a-t-elle été additionnée d'un peu d'hydrosulfite de sodium et d'indigo- 

 sulfate de sodium, ce qui donne de l'indigo blanc, on reconnaitra a la production, de 

 haut en bas, de bleu d'indigo, jusqu'a quel niveau l'oxygène a pénétré dans la masse. 

 La culture du ferment butylique permettra d'observer que les premières colonies 

 n'apparaissent que dans les régions oü l'on trouve de l'indigo blanc. Il faut dans cette 

 expérience que l'éprouvette soit conservée dans l'obscurité, sinon Ie bleu d'indigo 

 s'oxyde a la lumière et se décolore. L'oxygène ne Ie modifie pas au contraire a 

 l'obscurité. 



Un deuxième usage remarquable et général de cette methode, — mais qui n'est 

 cgalement applicable que si l'ensemencement est suffisamment dense, — consiste a 

 reconnaitre la présence de la fonction fermentative. Comme celle-ci est toujours 

 accompagnée de la production de gaz, et que la gelatine ne laisse pas échapper Ie gaz 

 formé, on voit a la présence de bulles gazeuses que la fonction fermentative existe. Le 

 ferment butylique surtout montre de cette maniere combien la production de gaz dans 

 le mout gelatine est intense. C'est par cette methode que l'on peut facilement s'in- 

 former si un sucre ou un hydrate de carbone en général, est fermentescible ou non '). 



Il y a encore un troisième point de vue auquel ce procédé peut rendre de grands 

 services, savoir la détermination du pouvoir réducteur. On ajoute a eet effet a la ge- 

 latine une matière colorante quelconque donnant par réduction un chromogène in- 

 colore. On emploiera par exemple le tournesol ou le bleu Coupier, itiais on obtiendra 

 de beaucoup les meilleurs résultats par l'indigosulfate de sodium. Le ferment buty- 

 lique développe dans ces expériences un pouvoir réducteur tnut particulièrement 

 intense. 



On voit donc que le procédé de L i b o r i u s présente maint^ avantages, sinon 

 pour la culture pure, au moins sous d'autres rapports importants. 



') C'est ainsi que je trouvai que la glycerine, la mannite, le saccharose et la dextrme 

 sont fermentescibles,avec production d'alcool butylique, d'hydrogène et d'acidecarbonique. 



