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Die Fakultati\ anacrobien siiul iiber die jjanze Flüssigkeit entweder jjleichmassig 

 verbrcitet oder iii der Kugel infolge der Schwere betrachtlich angehauft, immer je- 

 doch im Gasrobre sehr zahlreich. 



Die Obligatanaörobien sind iiber die ganze Flüssigkeit ziemlich gleichmjissig ver- 

 teilt, so dass deren relative Zabl besonders in Bezug auf die Aërobien im Gasrohrc 

 viel grösser ist, wie wenn in der Flüssigkeit alles gleichmassig gemischt wird. 



Die Erfahrung hat nun gezeigt, dass, wenn im Trennungsköibchen eine krriftige 

 Reduktiiin stattgefunden hat und man liisst einen Tropfen aus der Kapillarspitze 

 fliessen, darin sehr viel mehr Sulfidspirilien vorkommen, wie in den auf andere Weise 

 gewoniienen Pruben. 



Die zweite Form des Trennungskölbchens ist in Fig. 2 abgebüdet. Hier findet 

 sich das Ableitungsrohr für die Anaërobien im Innern. Dieses Rohr endet einerseits 

 offen in die Spitze des Gasrohres, andererseits in einen kleinen Trichter in der An- 

 schweliung des Köibchens, so dass daraus leicht mit einem Platinfaden oder einer 

 Kapillarröhre etwas Infektionsmaterial entfernt werden kann für weitere X'ersuche. 



Das Kölbchen wird beim Anfange des Yersuches mit durch Kochen sterilisierter 

 und luftfreier Niibrlösung dermassen angefüllt, dass der kleine Trichter frei übar 

 dem Niveau der Flüssigkeit herragt. Es wird nun auf die gewöhnliche Weise infiziert 

 und genau zugesehen, dass nichts in den Trichter hineinkommt. Das Infizieren muss 

 sofort nach dem Abkühlen geschehen, und zwar im Aussenraume mit möglichst viel 

 Impfmaterial, wodurch dem Luftzutritt ganz vorgebeugt wird. Beim Abkühlen ninss 

 nur (lic Kugel, nicht das Gasrohr mit Wasser übergossen werden, um die l'eber- 

 führung lufthaltiger Flüssigkeit ins obere Ende des Gasrohres durch das Sinken von 

 kalter in warnier Flüssigkeit zu verhindern. Bei einiger Geschicklichkeit kann man 

 die Kugel schon infizieren bei 25", wenn im Gasrohre die Temperatur noch 66° C 

 betragt. Diese Bemerkungen gelten ebenfalls für das in Fig. i abgebildete Kölbchen 

 mit ausserem Ableitungsrohre. Fürchtet man, dass Feuchtigkeit sich am Stiele des 

 Trichters absetzen uiici durch Kapillaritiit zur Tnfektioii des Innenrolircs veranlassen 

 wird, so kann vorher durch ein Tröpfchen Paraffin im Trichterchen das Innenrnhr 

 ganz abgeschlossen werden. Spriter kann die Paraffinschicht leicht mit dem Platin- 

 faden oder mit einer Kapillarröhre durchstochen werden zur Erhaltung von Impf- 

 material der im Rohre befindlichen Fakultativ- und Obligatanaërobien. Für die vor- 

 liegende Untersuchuiig wird im Aussenraume mit Grabenschlamm oder mit dem Sedi- 

 mente einer vorhergehenden Reduktion infiziert : im Innenraume wird dann die An- 

 haufung des ."^ulfidfermentes fmit anderen Spirillen) bemerkhar. 



Einen anderen Fortschritt machte das Kullurverfahren des Sulfidfcrmentes durch 

 die Beobachtung, dass die Gegenwart der gewöhnlichen kleinen Wasscrspirillen das 

 Wachstum des Fermentes sehr fördert. Da ich mm Formen von S p i r i 1 1 u m tenue 

 Cohn seit liingcrer Zeit fortzüchtcte, kniintc ich auch diese Eigenscliaft leicht in .\n- 

 wendung bringcn. 



S p i r i 1 1 u m ten u e wiichst auf dcii gcwöhidichcn Niibrbiiden zwar langsam, 

 doch ohne bes(jndere Schwierigkcit. Der Boden soll sehr schwacli alkalisch reagieren 

 und neutrale Salze organischer Siiuren enthalten. 'Die Gegenwart von Pepton ist 

 gunstig. Von meinen drei X'^arietaten verflüssigen zwei die NJihrgelatine durchaus 

 nicht, die dritte etwas. In Fleischbouillon entstehen wunderschöne Kuituren, worin 

 die Spirillen 20 und mehr Windungcn aimchnien. riiarakteristisch für die Spirillcn 



