122 



Aus der ini Reduktionskölbchen mit Sulfidfermenten bereiteten Nahrflüssigkeit 

 ist die Isolieruug sowohl vermittelst Cielatine, wie mit Agar gelungen, und zwar be- 

 sonders beim Agarverfahren ziemlich leicht. 



Die Agarnahrmasse war wie folgt bereitet: 



Eine sehr klare, zweimal filtrierte wasserige Agarlösung wurde langere Zeit mit 

 destilliertem Wasser ausgewaschen, zur vollstandigen Entfernung aller löslichen Kör- 

 per. Es wurde dazu die im Kochkölbchen erstarrte Masse einfach mit destilliertem 

 Wasser übergossen, welches oft erneuert wurde. Es wurde daim geschmolzen und auf- 

 gekocht, eine ausserst geringe Menge einer Nahrlösung zugesetzt, welche Natrium- 

 malat, Asparagin und Kaliumphosphat enthielt und aufs neue gekocht zur vollstan- 

 digen Entfernung der Luft. Wahrend des Abkiihlens wurde ein Tropfen einer klaren 

 neutralen Lösung von Mohrsalz zugegeben und eine so geringe Spur Natriumkar- 

 bonat, dass noch keine Trübung auftrat. Nachdem ein kleines Tröpfchen aus der 

 Kapillarspitze des Reduktionskölbchens tuchtig untergemischt war, wurde unverweilt 

 in Reagentienröhrchen oder in sehr flache Glasschalen und Glasdosen von verschie- 

 dener Konstruktion übergegossen und sofort in Wasser abgekühlt. Die Glasschalen 

 bestanden aus millimetertiefen, decimetervveiten Schalen, durch eine polierte Glas- 

 platte geschlossen, die Dosen (Fig. 3) aus den bekannten breiten Glasringen, worauf 

 geschlifïene Glasplatten gleicher Mittellinie genau passen, so dass ein flacher Raum 

 entsteht von der Tiefe der Glasringdicke, von der Weite des Glasringinnenraumes. 

 Dass bei einer solchen Versuchsanstellung weder in Reagentienröhren noch in Glas- 

 schalen eine vollstandig sauerstofïfreie Nahrmasse zu erhalten ist, ist bekannt, und 

 das Sulfidferment auf diese Weise zu kultivieren, wenn es allein gegenwartig ware, 

 wiirde auch nicht gelingen. Es finden sich aber im Aussaatmateriale massenhaft an- 

 dere Bakterien und diese machen nun zunachst das Medium ganz sauerstofffrei und 

 bereiten dasselbe auch, eben wie für die Nahrlösungen angegeben, auf andere Weise 

 vor, so dass das Sulfidferment nach zwei oder mehr Tagen darin geeignete Bedingun- 

 gen für Wachstum und Sulfatreduktion findet und Kolonieenbildung davon anfangt. 

 Sind als Nebenflora Spirillen vorherrschend, so wachsen die Kolonieen ziemlich lange, 

 jedenfalls geht die Reduktion dann ruhig fort, bis alles Sulfat zerlegt, alles Eisen als 

 Schwefeleisen abgesetzt ist. Spielen andere Bakterienarten als Spirillen neben dem 

 Sulfidfermente die Hauptrolle, so sind die Erscheinungen in den festen Substraten 

 sehr abwechselnd, oft überraschend und durchaus nicht immer erkliirbar. 

 Nicht selten beginnt die Reduktion in solchen Fallen stürmisch, um schon nach zw^ei 

 oder drei Tagen zur Ruhe zu kommen und nicht wieder zu beginnen. Die Kolonieen 

 sind dann so klein, dass man besser thut, von neueni anzufangen. Jedenfalls ist es 

 ratsam, nur gut ausgewachsene Kolonieen für weitere Kuituren zu verwenden, da selbst 

 darin die Zahl der Bakterien klein ist und oft kaum tausend betragt. Die Kolonieen 

 scheinen bei dem hier beschriebenen Verfahren zwar gross, doch rührt dieses von dem 

 Eisensulfürmantel her; wird dieser in Saure gelost, so verschwinden die Kolonieen 

 für das Augc oft ganz. Das Wachstum der Kolonieen kann dadurch gefördert wer- 

 den, dass eine .\garplatte, woriii dicselbcn vorkommen, entweder ganz aus den Glas- 

 platten gelost oder noch zum Teil oder ganz dazwi.schen geschlossen in eine für 

 Sulfatreduktion geeignete Nahrlösung untergetaucht wird. Wird die Flüssigkeit dann 

 und wann erneuert, so kann das Wachstum der Kolonieen lange fortdauern. Dunne 

 Agarplatten könncn fiiglich ineinandergernllt, in weithalsige Stöpselflaschen gebracht 



