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2. Methodes de recherche. 



Le principe sur lequel est fondée Ia methode de recherche que j'ai suivie 

 pour 1'étude du PA. phosphorescens, consiste a mêler un tres grand nombre de ces 

 bactéries avec une masse nutrivite insuffisante, ne contenant que quelques éléments 

 connus de 1'aliment nécessaire, puis a déterminer par l'addition de quelles sub- 

 stances eet aliment peut être rendu complet, c'est a dire capable d'exciter 1'ac- 

 croissement et la fonction lumineuse. Ces essais peuvent se faire soit dans des 

 liquides de culture, soit dans une gelatine de culture. Dans des liquides nourri- 

 ciers, on peut tres bien juger de 1'action lumineuse, mais 1'estimation exacte de 

 la multiplication des bactéries y est difficile. Dans la gelatine de culture, au con- 

 traire, le développement de lumière et 1'accroissement des colonies se laissent dé- 

 terminer tous les deux avec beaucoup de netteté, par contraste. de Ia maniere 

 suivante *). 



Dans une gelatine de culture appropriée a 1'action photogénique, et oü 1'un 

 des éléments nutritifs se trouve en exces, on incorpore un tres grand nombre de 

 bactéries de 1'espèce a etudier. Etendue en couche mince, cette masse forme une 

 plaque fortement lumineuse. Au bout de quelque temps, l'émission de lumière 

 cesse, et avec elle 1'accroissement: a partir de ce moment, il n'y a plus dispo- 

 nible que 1'élément nutritif ajouté en exces. Porte-t-on alors sur la couche de 

 gelatine les substances a étudier, celles-ci se dissolvent localement dans la gelatine 

 et, a partir du centre de dissolution, se diffusent dans toutes les directions. en 

 un champ circulaire. Si la substance est un aliment photogénique, on voit ap- 

 paraitre bientót, parfois au bout de quelques secondes, un champ lumineux, qui 

 s'étend avec la vitesse de diffusion de la matière en question; 1'extension cesse 

 quand la totalité de cette matière a été fixée par les bactéries, qui dès lors con- 

 tinuent a produire de la lumière au moyen de la réserve accumulée dans leur 

 corps. On reconnait ainsi, a première vue, que les sucres assimilables sont plus 

 fortement absorbés que 1'aliment photogénique par excellence : la glycerine. L'étendue 

 des champs du diffusion ne dépend toutefois pas uniquement de 1'absorption plus 

 ou moins facile par les bactéries, et de 1'activité et du nombre des bactéries suspen- 

 dus dans la gelatine, mais aussi, comme il a été dit, de la vitesse de diffusion de 

 la substance. 



Lorsque 1'aliment est propre a entretenir la croissance et la division cellulaire, 

 son action ne se borne pas a produire un phénomène lumineux, temporaire de 

 sa nature: il donne lieu, en outre, a un »champ d'accroissement« durable, a un 

 «auxanogramme**), caractérisé par les innombrables colonies bactériennes qui, dans 

 Ie champ de diffusion de la substance nutritive, se sont développées beaucoup 

 plus fortement qu'en dehors, d'ou résulte un contraste frappant. Quand 1'aliment 

 agit de cette fac,on, il peut étre appelé »plastique«. Je ferai remarquer, dès a pré- 



') On trouve la description de cette methode, appliquée aux bactéries lumineuses, 

 <!aus la dissertation de M. le Dr. H. P. Wijsman: De diastase beschouwd als mengsel 

 van maltas e en dextrinase, Amsterdam, 1889; appliquée aussi a d'autres microbes, dans 

 1111111 Mémoire: L'Auxanographie, >m la methode de l'hydrodiffusion dans la gelatine, 

 appliquée aux recherches microbiologiques (Arch. néerl., 'I'. XXIII, p. 367, 1889, et Versl. 

 en Mededeel, d. K,<n. Akad. v. Wet., Aid. Natuurk., Deel VI, p. 121, 1889). 



! ) Voir le Mémoire ci-dessus cité: L' Auxanographie, etc. 



