RIUNIONE GENERALE IN FIRENZE IGl 



Si colora anche facilmente col metodo di Grani — o meglio 

 con una sua modificazione — impiegando come sostanza colo- 

 rante la soluzione idroalcoollca di facsiaa, oppure quella di 

 vesuvma, e poi facendo seguire — per uno o due minuti al più — 

 il trattamento colla soluzione di jodio in jodto'o potassico aWl 

 per duecento. La colorazione però non riesce qualora s'impie- 

 ghi per sostanza colorante una soluzione di Ehrlich, come si 

 consiglia generalmente per le altre specie. 



Per farne la ricerca nei tessuti bisogna colorarne le sezioni, 

 al quale intento si presta benissimo la soluzione ac(iuosa diluita 

 di azzurro di metilene, facendovele soggiornare da 10-15 minuti, 

 facilitando l'azione della sostanza colorante con moderato riscal- 

 damento, e decolorandole in acqua leggermente acidulata con 

 acido acetico. Però giova meglio ricorrere al metodo di Gram, 

 col quale com'è noto si raggiunge Io scopo d'ottenere una colo- 

 razione isolata dei batteri, lasciando incolori i nuclei. Se poi 

 in questo caso si vuole conseguire una colorazione doppia, si 

 può usare, con vantaggio, il picrocarminio come colore nu- 

 cleare; ed é anzi preferibile far precedere la colorazione nucleare 

 con picrocar minio all'impiego del metodo di Gram. 



Sviluppo. — Per seguirne lo sviluppo sono ricorso a due vie, 

 nella prima delle quali esaminavo, almeno due volte al giorno, 

 nei preparati estemporanei quelli d'una data coltura; e nella 

 seconda ne ho seguita la moltiplicazione sotto il campo del 

 microscopio nei preparati in goccia pendente. Il risultato è stato 

 il medesimo: i bacilli prima di moltiplicarsi si allungano alquanto 

 e quasi subito il protoplasma — da prima uniforme — si porta 

 alle estremità polari della cellula; poi si forma una specie 'di 

 solco ed un tramezzo in direzione della linea mediana trasver- 

 sale, il quale è preceduto dalla deposizione di granulazioni lucide 

 fortemente rifrangenti. Segue poi la divisione in due nuovi 

 bacilli, i quali, il [)iù delle volte, per qualche tempo, rimangono 

 attaccati mediante tratti d'unione di sostanza protoplasraatica, 

 che stabilisce le comunicazioni intracellulari; e questi cordoni 

 protoplasmatici sono ricoperti all'esterno da quella sostanza 

 gelatinosa di cui ho parlato prima. 



Sporificazione. — In adatte condizioni di temperatura, cioè 

 a 16''-18''C. nelle colture sulle patate, a 22''-25° in agar sem- 

 plice e glicerinata, leggermente alcalina od anche neutra, spo- 



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