428 H. Hrunswik, 



Für meine Untersuchungen verwendete ich übersättigtes 

 Toluolu-asser-Amygdalin (5 "/o Amygdalinlösung mit über- 

 schüssigem Toluol knapp vor Eintragen in die Glaskammer gut 

 geschüttelt), übersättigtes Chloroformwasser - Amygdalin 

 (5Vo Amygdalinlösung mit Chloroform im Überschuß knapp vor 

 Gebrauch geschüttelt), so daß auch ungelöstes, bloß emulgiertes 

 Chloroform (Toluol) in die Glaskammer gelangte und gesättigtes 

 (4 7o) Natriumfluorid- Amygdalin. Soweit untersucht, konnte 

 bei keinem der genannten drei Antiseptica eine enz}'mhemmende 

 Wirkung beobachtet werden, ja bei Natriumfluorid zeigte sich an 

 tierischen Objekten (Maikäfer, Rinderleber) sogar eine gewisse 

 Förderung, die wohl der Salzwirkung zuzuschreiben sein wird 

 (Parallelversuche mit Chloroform und T(^luol wurden ohne phj^sio- 

 logische Kochsalzlösung geprüft!). 



c) Vorteile der mikrochemischen Methode. — Empfind- 

 lichkeit. — Schon aus der eben angeführten Tabelle lassen sich 

 die Möglichkeiten erkennen, die die beschriebene Methode bietet. 

 Die Zeitspanne, die das Ferment (Emulsin) unter den gegebenen 

 Bedingungen braucht, um eben in seiner Wirkung einzusetzen, 

 läßt sich genau feststellen (Aktivierungszeit). Ihi Ende tritt dann 

 ein, wenn das empfindlichere Benzidinreagens bereits positiv auf 

 HCN reagiert, während in"> Silbernitrattropfen noch kein AgCN 

 ausgefallen ist (vgl. in der Tabelle Nr. 4 und 5 bei der 1. Kon- 

 trolle!); die Zeit, welche vom Entstehen von HCN in der Mazera- 

 tionsflüssigkeit bis zur Reaktion derselben im hängenden Tropfen 

 verstreicht, ist hierbei als ein in allen Fällen konstanter Fehler in 

 Rechnung zu stellen. Ein Vergleich der Wirksamkeit von 

 Emulsinen verschiedener Herkunft ist somit ermöglicht. — Die 

 Fällung von Silbercyanid im hängenden Ag N03-Tropfen erlaubt 

 jedoch auch eine quantitative Abschätzung der entstandenen 

 Blausäuremengen; die Intensität der fermentativen Amygdalin- 

 spaltung zweier emulsinhaltiger Objekte läßt sich — unter sonst 

 gleichen Bedingungen — daher ebenfalls in relativem Maßstabe 

 vergleichen. Da infolge der Empfindlichkeit der HCN-Reagentien 

 hierzu nur äußerst geringe Substanzmengen erforderlich sind, kann 

 diese Mikroreaktion als orientierende Vorprobe bei Untersuchung 

 der Enzymwirksamkeit und Spaltungsintensität irgendeines 

 Emulsins dienen. Emulsin konnte z. B. in einem dünnen Quer- 

 schnitt von Seeale eornntnm und in einem zerquetschten Samen- 

 körnchen von AnthyUis vnhicraria (zirka 2 iniu im Kubus) auf 

 diese Weise innerhalb weniger Stunden (zwei bis vier) nachgewiesen 

 werden. 



d) R e s u 1 1 a t e b c i A n w e n d u n g d e r R c a k t i o n a u f P fl a n z e n o b j e k t e. — 

 Bertrand und Rivkind i haben anläßlich einer rntersuchung über das Vorkommen 

 des \^icianins bei den Leguminosen auch der X'erbrcitung des Kmulsins in 



1 R. Bertrand und 1.. Rivkind, I.e. (190H), p. 970. 



i 



