E. Wasserzug. — Pymcipaztx procédés de coloraiion des Bactéries. 323 



lore rapidement le protoplasma et respecte les spores qui restent 

 fortement colorées. Pour rendre la préparation plus nette on 

 colorera à nouveau le protoplasma par un peu d'éosine, par 

 exemple, et la préparation apparaîtra alors avec des Bacilles 

 teints en rose dans lesquels se détacheront admirablement des 

 points d'un bleu foncé qui ne seront autres que les spores endo- 

 gènes. 



III. Coloration des tissus. — Nous passerons rapidement sur 

 la coloration des tissus, qui intéresse surtout les histologistes et 

 n'est employée que dans l'étude des Bactéries pathogènes. C'est 

 surtout dans ce procédé que l'on fait constamment usage de la 

 double coloration qui permet de distinguer les Bactéries noyées 

 dans l'intérieur du tissu. On colore habituellement les Bactéries 

 en bleu violet et les cellules en rose, ou inversement. Le tissu 

 que l'on veut examiner est durci et plongé dans la paraffine 

 d'après les procédés bien connus des histologistes. Les coupes 

 faites au microtome et débarrassées de la paraffine sont plongées 

 dans un bain colorant de violet de méthylène, par exemple^ qui 

 colore également toute la préparation. Le traitement ultérieur 

 dépend beaucoup des Bactéries auxquelles on a affaire, mais on 

 se sert presque constamment d'une méthode de décoloration 

 excellente due à Gram qui lui a donné son nom. Toutefois cette 

 méthode ne peut être employée qu'avec des préparations colo- 

 rées par des solutions à l'eau d'aniline. On mélange : 



Iode I gr. 



lodure de potassium 2 gr. 



Eau distillée 300 gr. 



Les coupes colorées fortement par le bain de violet de méthyle 

 ou mieux de violet de gentiane sont lavées à l'eau distillée et 

 placées pendant une minute ou deux dans la solution iodo-iodu- 

 rée. La coupe prend une teinte violet-noiràtre. On la plonge en- 

 suite dans l'alcool absolu jusqu'à décoloratiojt complète à l'œil 

 nu. On lave et on monte dans le baume. On obtient ainsi du pre- 

 mier coup une préparation parfaite dans laquelle les Bactéries 

 sont colorées en bleu foncé et le tissu cellulaire en teinte légère 

 d'un jaune clair. 



L'emploi de la méthode de Gram peut être recommandé dans 

 le cas des simples Bactéries en suspension dans un liquide de 



