Diphtheriebacillus. Gewinnung wirksamen Diphtlieriegiftes. 265 



Dosis von ^/.,Q ccmMeersclivveiuclien von 500 g innerhalb 48 Stunden töcltete. 

 Die Giftbildung schien gewöhnlich nach 5-6 Tagen ihren Höhepunkt zu 

 erreichen, indem zu dieser Zeit sogar 0,005 ccm ausreichten, um ein Thier 

 von 500 g zu tödten. 



Zur Toxingewinnung ist es nicht nöthig, die Cultur durch ein Bacterieu- 

 filter zu schicken. Es genügt 3 ccm Carbolsäm-e (nicht mehr!) pro 1 hin- 

 zuzufügen und durch Papier zu ültriren, um eine völlig klare und haltbare 

 Giftlösung herzustellen. Sobernheim. 



L. Martin (706) hat sich bemüht, einen Nährboden herzustellen, 

 welcher durch das Wachsthum der D.-B. keine, selbst nicht eine vorüber- 

 gehende Säurung erfährt und somit für die G e w i n n u n g eines möglichst 

 wirksamen Toxins nach allen Erfahrungen besonders geeignet sein 

 musste. Er empfiehlt für diesen Zweck eine „ Seh weine mag en-Bouillon", 

 deren Bereitung am besten folgendermaassen geschieht: Eine Anzahl von 

 Schweinemägen, etwa 5, werden fein zerhackt; hiervon nimmt man 200 g, 

 fügt 10 ccm reine Salzsäure und 1000 ccm Wasser hinzu und hält diese 

 Aufschwemmung etwa 1 2-24 Stunden bei 50 ^. Es erfolgt während dieser Zeit 

 eine sehr intensive Verdauung (Peptonisirung) der Gewebe unter deniEinfluss 

 des Pepsins der Magenschleimhaut und der Salzsäure. Man erhitzt hierauf die 

 Bouillon auf 100^, filtrirt durch hydrophile Watte, erwärmt das Filtrat 

 abermals und alkalisirt bei einer Temperatur von etwa 80 ^, indem man 

 der genau neutralisirten Lösung (Lackmus) noch 7 ccm Normal-Sodalösung 

 (pro 1) hinzufügt. Der entstehende Niederschlag wird mittels Papierfilters 

 abfiltrirt, die Bouillon nun auf 120^ erhitzt, nochmals filtrirt und endlich in 

 sterilisirte Culturgefässe eingefüllt und sterilisirt. 



Die so durch Selbstverdauung des Magens gewonnene Peptonlösung stellt 

 nach M. ein vortreffliches Nährmedium dar, in welchem D.-B. üppig gedeihen 

 und erhebliche Toxinmengen produciren. Noch bessere Resultate ergab 

 jedoch die Vermischung dieser Schweinemagen-Bouillon mit einer in beson- 

 derer Weise hergestellten Kalbfleisch-Bouillon. Die Vorschrift für 

 die letztere ist folgende: 500 g fein zerhacktes Kalbfleisch werden mit 1000 

 ccm Wasser Übergossen und 20 Stunden im Brutschrank bei 35 " macerirt. 

 Das Fleisch wird nun ausgepresst und die erhaltene Flüssigkeit mit 5 g 

 Kochsalz (pro 1) versetzt. Diese Kalbfleischbouillon mischt man mit gleichen 

 Theilen der Schweinemagen-Bouillon, erhitztauf 70*^, filtrirt durcli Papier, 

 neutralisirt und sterilisirt. 



Mit Hülfe dieses Nährbodens gelang es, ein Toxin zu erhalten, das in der 

 Dosis von 0,002 ccm Meerschweinchen von 500 g tödtete. D.-B. entwickel- 

 ten sich darin schon nach 24 Stunden sehr üppig unter Bildung einer Deck- 

 haut. Die Giftproduction pflegte nach 5-7 Tagen ihren Höhepunkt zu er- 

 reichen, vom 10. Tage an abzunehmen. Eine grössere Anzahl verschiedener 

 Culturen ergab in dieser Eichtung übereinstimmende Resultate. 



Bei weiteren Untersuchungen über die Ursache der Säurebildung in den 

 gewöhnlichen Nährsubstraten fand M., dass von den Zuckerarten zwar Gly- 

 kose, Lävulose, Glycerin u. a., nicht aber z. B. Glykogen Säuerung hervor- 

 bringen. Der Glykogengehalt des Pferdefleisches kann also nicht ohne 



