862 Allgemeine Methodik. Färbungsverfahren. 



Ziemann das Höchster Methylenblau medicinale allen anderen vor; es 

 können aber alle Arten, jedoch unter Beobachtung folgender Vorsichts- 

 inassregeln, benutzt werden. 



1. Von den krj'stallisirten Arten mit grünem Reflex mischt man 100 ccm 

 einer einprocentigeu Lösung mit 4 ccm Normalnatronlauge, lässt die Flüssig- 

 keit 3 bis 4 Stunden bei 20-25 •* C. stehen und fügt dann 4 ccm Normal- 

 salzsäure hinzu. 



2. Die krystallisirten Sorten mit violettrothem Reflex, d. h. die Chlor- 

 zinkdoppelsalze, erfordern die doppelte Menge obiger Zusätze. Bei der 

 spätem Verwendung setzt man pro 1 ccm benutzter Methylenblaulösung 

 1-4 Tropfen einer 5^/o krystallisirte Soda enthaltenden Lösung hinzu. 



Besondere Vorschriften giebt Verf. für Methylenblau 2 B extra der 

 Berliner Anilinfabrik, Mekck's Methylenblau medicinale, Methylenblau 

 B X N der Badischen Anilinfabrik, das Höchster und das Berliner Chlor- 

 ziukdoppelsalz. Durch den Sodazusatz werde die Chromatinfärbung be- 

 günstigt und beschleunigt. Bei Höchster Methylenblau (medicinale Ref.) 

 sei Vorbehandlung mit Natronlauge nicht nöthig, es genüge Zusatz von 

 ein Tropfen Soda (d. h. 5proc. Lösung Ref.) pro 1 ccm. Noch besser werden 

 50 ccm der Iproc. Lösung mit 3-4 ccm Sodalösung versetzt und in 8-10 

 Tagen verbraucht. Schimmelbildung wird durch Zusatz von 5 ccm einer 

 Lösung von 1 Thymol in 10 ccm Alkohol auf 500 ccm der Methylenblau- 

 lösung verhindert. 



Als Eosin benutzt Verf. Brom-Eosin BA extra Höchst in lOproc. Lösung. 

 Zur Differenzirung und Entfärbung dienen ihm a) für Blutpräparate Essig- 

 säure, Methylenblau (2 g Methylenblau in 400 ccm Wasser und 1 ccm 

 Eisessig). Hierdurch wird ohne Schaden für zarte Plasmafärbungen in 

 2-4 Stunden das Blau [Ref.] aus den Hämogloben ausgetrieben, hellt in 

 3-5 Stunden (bei zweimaliger Benutzung) das Präparat sehr gleichmässig 

 auf und kann während 5-10 Minuten das Präparat behufs Neufärbung 

 entfärben, b) für Bacterien Eosin 1 : 500 oder Methylenblau 1 : 10000, 

 mitunter auch die Lösung a. 



Als bestes Verhältniss zwischen Methylenblau und Eosin hat er für alle 

 Sorten 2 : 1 gefunden. 



Die Lösungen bewahrt er in weithalsigen Pulverflaschen von 80-100 ccm 

 mit Vollpipetten auf. 2 ccm Methylenblaulösung werden in einen kleinen 

 Porzellantopf mit Ausguss gegeben, und (ev. nach Zusatz von 2 Tropfen 

 Sodalösung) mit 1 ccm Eosinlösung unter Umschwenken versetzt. Hiervon 

 wird ohne Rücksicht auf etwaige Niederschläge auf 5-6 Deckglaspräpa- 

 rate gegossen und nach 2-5 Minuten Einwirkung mit Wasser gut abge- 

 spült (im heissen Sommer geht die Wirkung schneller vor sich als bei ge- 

 wöhnlicher Zimmertemperatur). Bei Blutpräparaten genügt meist ein- 

 maliges Spülen mit essigsaurem Methylenblau zur Difterenzii-ung; bei 

 Bacterien muss aber oft 2-6mal die Eosinlösung 1 : 500 wirken und eventuell 

 ist noch sehr kurze Gegenfärbung mit Methylenblau 1 : 10000 noth- 

 wendig, da durch die Eosinlösung auch die Methylenblaufärbung geschädigt 

 wird. Zur Härtung der Präparate genügt Fixiren in der Flamme. Eine 



