868 Allgemeine Methodik. Färbungsverfahren. Geisselfarbung. 



in einem Reagensgias Wasser unter Erwärmen gelöst) wird zu 500 ccm 

 frischer 5proc. Tanninlösung bis zu bleibendem Niederschlag in einem 

 Kölbchen bei 35-40*' im Wasserbade zugesetzt. Fertige Beize soll kalt 

 stark opalisiren, ohne uudurclisichtig zu sein, bei massigem Erwärmen aber 

 ganz klar werden. Bei zu starkem Niederschlag wird erwärmt und Tannin- 

 lösung zugegeben. Die Beize wirkt sehr stark und klar. Die Wirkung 

 wii'd gesteigert 1. wenn das Präparat in der heissen Beize erkaltet, bis 

 diese sich eben anfängt zu trüben (gerbsaures Autimonoxyd), 2. durch vor- 

 sichtiges Neutralisiren mit Natronlauge bis zur amplioteren oder schwach 

 alkalischen Reaction. Bei zu viel Natronlauge bildet sich jedoch plötzlich 

 dicker Niederschlag. Für sehr feine Geissein ist amphoter reagirende Beize 

 vortheilhaft, hält sich im Gegensatz zur nicht neutralisirten Beize jedoch 

 nur wenige Stunden. 



Die Präparate selbst stellt Zettnow nun in folgender Weise her: 



/. Her>;teUmig des Ausstrichen. Aerobiotische Arten wnirden auf der 

 Oberfläche einer nicht sehr steifen Agarplatte oder in dünner Schicht 

 Bouillon (den Boden eines Kolbens bedeckend), anaerobiotische stets in letz- 

 terer gezüchtet. 10-20 Stunden alte gut bewegliche Cultiu-en (Bouillon bei 

 kräftiger Trübung) werden abgetödtet, Bouillonculturen werden vorsichtig 

 von etwaigem Bodensatz ab in einige ccm 4proc. Formalin gegossen, Agar- 

 platten aber mit Wasser abgespritzt und die trübe Flüssigkeit mit Formalin 

 versetzt. Sedimentation im Spitzglas in 24-72 Stunden. Decantiren, Auf- 

 schwemmen mit Iproc. Formalin. Das Verfahren wird noch zweimal wieder- 

 holt, zuletzt mit reinem Wasser, da Formalinwasser sich beim Ausstreichen 

 zu Tröpfchen zusammenzieht. Die Fixiruug mit Formalin zieht Verf. vor, 

 da durch Osmiumsäure und Sublimat die Färbbarkeit der Geissein leiden 

 soll. Die lixirten Bacterien lassen sich in kleinen Fläschcheu mit Iproc. 

 Formalinwasser lange aufbewahren. Centrifugiren führt wohl schneller 

 zum Absitzen, doch verlieren empfindliche Arten dabei leicht ihre Geissein. 

 Reine fettfreie Deckgläser sind für die Präparate erforderlich; Präparate 

 werden durch massige Hitze fixirt und so in \'orrath aufbewahrt. 



//. Die Beixiing. Die fixirten Präparate werden mit Wasser abgespült, 

 die bestrichene Seite nach unten in ein Blockschälcheu gelegt, mit der ev. 

 durch Erhitzen geklärten Beize Übergossen und auf einer 70-80° heissen 

 Platte im bedeckten Schälchen 5-10 Minuten gebeizt. Herausnahme mit 

 Pincette, Abspülen zwischen 2 Fingern mit Wasserstrahl (Verf. benutzte 

 das Berliner Leitungswasser). Zum Erhitzen dient eine 25 qcm grosse 

 Eisenplatte, welche durch Kronenbrenner erhitzt wird. Die so gebeizten 

 Geissein werden durch Gold oder Silber sichtbar gemacht. 



///. Ooldniethode. Auf das gebeizte Präparat kommt Goldchlorid, 

 neutral, 1:2000, Erwärmen bis zur kräftigen Dampf bildung. Controle 

 des Ausfalls der Geisseifärbung mit mittelstarken Trockensystemen (2 B. 

 Zeiss Apochroma 8 mm Oc. 8 oder Leitz 7 Oc. 3). Die Geissein müssen 

 damit wenigstens scliwach erkennbar sein, sonst war die Beizung zu schwach. 

 Im letzten Fall mache man aber lieber ein neues Präparat, da Wiederholung 

 des Processes nicht lohnt. Das Präparat kann auch auf folgende ^Veise 



