CERIJET.lRI ASUPUA FAGOCITOZEI EMBIIONULUl 229 



După ferestniirca oiiălor în a doua zi de incubaţie, injectăm cu jjipeta sub controlul 

 lupei binocidare, în spaţiul subenibrionai', o cantitate de tuş diluat. Cantitatea injectată 

 trebuie .să fie tocmai suficientă pentru a umple spaţiul subembrionar. Embrionul apare, 

 după o injecţie reuşită, foarte distinct, cii organele sale primitive, albicioase şi net vizi- 

 bile, ca un obiect semitransparent observat pe fond negru. Acest efect ne dispensează de 

 a face coloraţii vitale ale embrionului, jientru a pune în evidenţă organele sale. Injecţia 

 fiind inofensivă, prccedeiil poate înlocui, pentru unele cercetări, coloraţia vitală. înţeparea 

 blastodermului pentru injectarea spaţiului subembrionar se face departe de corpul em- 

 brionului, la marginea dintre aria opacă şi aria pelucidă. După injecţie, embrionii sînt 

 lăsaţi să se dezvolte mai departe. Noi citim efectul intervenţiei noastre începind cu a 

 treia zi de incubaţie (deci 24 de ore după injecţie). 



Excizăm, cu ajutorul unui foarfece cuib, embriomd împreună cu aria sa vasculară 

 (secţionînd în afara sinusului marginal membrana extraembriouară) ; scufimdăm globul 

 vitelin în soluţie cloruro-sodică izotonică, în care porţiunea excizată devine flotantă. 

 Cu o spatulă ridicăm embrionul împreună cu aria sa pelucidă şi opacă şi îl spălăm 

 cu grijă într-im cristalizor cu soluţie clorxu-o-sodică fiziologică, pentru a-1 debarasa de 

 resturile de vitelus liber, de obicei aderente de faţa inferioară a formaţiunilor embrionare. 



După spălare, montăm întreaga formaţiune embrionară pe o lamă, pe care o scu- 

 fundăm apoi într-un vas conţinînd formol (o parte formol, patru părţi apă). După o fixare 

 de 24 de ore preparatul este clarificat în glicerina şi după alte 24 de ore este gata pentru 

 a fi examinat, ca preparat total. 



Alte blastoderlne au fost fixate (după ce au fost izolate în modul descris) în fixa- 

 toriil Helly, deshidratate, incluzionate în parafină şi secţionate în serie. 



La examenul cu lujia binoculară al preparatelor totale, clarificate în glicerina, 

 impresionează aspectul „tatuat" al zonei interne a cadi-ului vitelin, al ariei opace, adiacente 

 ariei pelucide (fig. 148 şi 149). Observată la microscop cu obiective puternice şi cu ajutond 

 contrastului de fază, ne putem con-vinge că, în zona cu aspect tatuat, celulele endoder- 

 mului vitelin au fagocitat intens tuşul. Acesta se află acum în interiorul celulelor, în cea 

 mai mare parte absorbit pe suprafaţa globulelor viteline, care în această perioadă de 

 dezvoltare (3 zile de incubaţie) stau în interiorul celidelor endodermului vitelin, ocupînd 

 vacuolele caracteristice ale acestor celule (fig. 150 şi 151). 



Granulele de tuş nu pătrund în interiorul globiilelor viteline, ci sînt dispuse destul 

 de regulat, formînd uneori un strat uniform pe suprafaţa lor. 



Găsim şi grămezi de diferite mărimi, formate din granule de tuş adunate în cito- 

 plasmă celulelor endodermice, deci lingă globulele viteline (fig. 152). 



Fenomenul de fagocitoză descris este net limitat la cadrul vitelin. Celulele endo- 

 dermului din zona pelucidă, care continuă endo<Termul vitelin al zonei opace, nu fagoci- 

 tează. Excei)ţional găsim cîte un element conţinînd grăunţe de tuş, element care însă este 

 totdeauna în acelaşi tim^î şi încărcat cu picături lipidice (sau chiar cu elemente viteline) 

 mai mari decît celulele înconjurătoare (fig. 162 şi 163). 



Examenul ariilor opace secţionate ne convinge de situaţia intracelulară a granulelor 

 de tuş fagocitate. Eezultatul obţinut ne întăreşte convingerea că încărcarea cu globule 

 viteline a endodermului ariei opace se datoreşte unui proces de fagocitoză. 



ISTe-a interesat şi comportarea sau soarta tuşnlui care a rămas în fundid cavităţii 

 subembrionare în contact cu elementele viteline, extracelulare. 



Spre deosebire de ceea ce s-a putut observa în interiorul celulelor endodermului 

 vitelin, unde, cum s-a spus, s-a produs absorbţia foarte regulată a tuşului pe suprafaţa 



