66 Raffaele Issel 



specialmente per mettere in evidenza micronuclei difficilmente colo- 

 rabili. Nei casi in cui ho potuto disporre di materiale molto ab- 

 bondante, invece di agire sotto il coprioggetti per sostituzione di 

 liquido, ho versato in una piccola provetta una certa quantità di 

 li(luido palleale, ottenuto spremendo dei frammenti di branchia, a 

 cui ho aggiunto un i)o' di soluzione al 30% <^i formalina (= 13% 

 di formaldeide) in acqua di mare. Quando il sedimento si è deposto 

 in fondo al tubo si decanta e si sostituisce un po' di carmallume, 

 indi soluzione di allume 1 %, finche il liquido resta scolorato, poi 

 alcool, cominciando da quello a 30% e arrivando fino all' assoluto. 

 Si j)repara infine in vetro da orologio una soluzione di 3 parti di 

 alcool assoluto ed 1 di glicerina e vi si versa il sedimento, poi si 

 lascia evaporare lentamente l'alcool. Posta una goccia di glicerina 

 col sedimento sul portaoggetti e coperta la preparazione, si vedrà 

 al microscopio come gli infusorii siano per la maggior parte impi- 

 gliati in ammassi di corpi estranei : frammenti di epitelio branchiale, 

 corpuscoli del sangue, nemaspermi, uova ecc.; ma, muovendo deli- 

 catamente il coprioggetti, si riuscirà ad isolare parecchi individui 

 sì da poterli osservare comodamente. Per colorare anche il plasma 

 giova aggiungere agli alcool di lavaggio una piccolissima quantità 

 di acido picrico, e per rendere evidenti le ciglia un po' di soluzione 

 alcoolica di acido pirogallico; a tal uopo serve anche il metodo 

 proposto recentemente da Schewiakoff (26), che consiste nel trat- 

 tare la goccia d'acqua contenente infusori prima coli" acido os- 

 mico 1%, poi coir ematossilina di Delafield molto allungata. 

 Tenendo gli Ancistridi per un' ora nell' acido osmico l % poi per 

 un' altra ora nella ematossilina diluita sì da impartire una leggiera 

 colorazione violetta all' acqua, il corpo non assume colorazione 

 mentre si colorano le appendici vibratili ; debbo però dire che, anche 

 variando la durata di azione dei reattivi, non sono riuscito ad ot- 

 tenere una colorazione abbastanza viva delle ciglia senza tingere 

 un poco anche il cor})©. Per la ricerca dei grassi, ho applicato agli 

 infusori il metodo introdotto dal Daddi (9) nello studio dei tessuti 

 adiposi, trattando gli infusori fissati al sublimato 2'yo con una solu- 

 zione satura in alcool a 70**/o di rosso Sudan III. I granuli grassi 

 si colorano vivamente in pochi minuti mentre gli altri elementi del 

 protozoo rimangono affatto scolorati. Per ottenere colorazioni vitali 

 ho adoperato il rosso neutro (Neutralroth); una soluzione satura in 

 acqua di mare serve benissimo allo scopo e si conserva a lungo 

 inalterata. 



