Ricerche sul canale digerente delle larve dei Lamellicorni fitotagi. 63 



in serie. Oltre a questo però mi sono servito, per conoscere bene 

 la topografia, anche dei preparati in toto fatti distendendo su un 

 portaoggetti un sacco o la metà di esso, antecedentemente ben pu- 

 lito neir interno col pennello. Ricoprivo quindi con un altro porta- 

 oggetti uguale la preparazione e legavo insieme i due portaoggetti. 

 Il sacco in tal modo compresso era fissato, indurito e colorato coi me- 

 todi ordinari. Per rendere trasparente il preparato e specialmente 

 la chitina, prima di includerlo nel balsamo lo immergevo per 10 o 15 

 minuti in olio di garofano, che rende la chitina assai diafana. 



Per il metodo delle sezioni tutti i colori sopra notati mi hanno 

 dato buoni risultati. Ho ottenuto però doppie colorazioni assai 

 buone, specialmente del retto, attenendomi alle seguenti norme. 

 Dopo di avere colorato il proctodaeum col carminio boracico, mercè 

 il metodo solito, quando il preparato era stato in alcool assoluto 

 per 24 ore, lo passavo in una soluzione satura di acido picrico in 

 alcool assoluto. In questo liquido lo tenevo per 10 minuti soltanto 

 e quindi lo passavo di nuovo in alcool assoluto per togliervi l'ec- 

 cesso di acido picrico e ve lo tenevo due ore circa; lo immergevo 

 finalmente in cloroformio per includerlo nella paraffina e tagliarlo. 

 La doppia colorazione ottenuta con questo metodo è assai migliore 

 di quella che si ha dalla colorazione col semplice picrocarminio. 



Per poter bene studiare la costituzione dello strato di chitina che 

 ricopre tutto il proctodaeum mi sono servito del metodo della isola- 

 zione di questa membrana. 



Ho preferito sempre, per ottenere una buona preparazione in un 

 tempo relativamente breve , di porre in una soluzione di potassa 

 caustica al 40% in acqua distillata il proctodaeum fresco. Dopo 

 24 ore l'azione della potassa su tutti i tessuti è completa, essi sono 

 totalmente sciolti e non rimane che l'intima chitinosa insolubile. La 

 membrana viene poscia tolta dalla soluzione di potassa e lavata bene 

 in acqua; per toglierle l'alcalinità la pongo per altre 24 ore in acqua 

 acidulata con acido cloridrico; dopo si lava nuovamente con acqua 

 distillata e si pone prima in alcool, e quindi in cloroformio, a tem- 

 peratura di 30 35 gradi, per togliere quei resti di materie grasse 

 che potessero essere sfuggiti all' azione della potassa. 



Dal cloroformio si pone nuovamente in alcool a 90 e dopo che 

 vi è stata qualche ora si toglie dall' alcool e si mette per circa 

 due ore nel colore, carminio boracico od ematossilina, si riporta 

 nuovamente in alcool, e si può includere distendendola con precauzione 

 sul portaoggetti in balsamo del Canada od in glicerina. 



