Untersuchuugeu über dcu Generationswechsel von Trichospliaenum Sieboldi Sehn. 155 



weil dann die vorhin erwähnten Inhaltsgebilde mitgefärbt wurden. Eine noch kürzere Färbiings- 

 zeit gestattet eine im liiesigen Institut gebräuchliche 4.Sprozentige alkoholische Alaunkarmin- 

 lösnng, weil sie schneller eindringt. 



Für das Studium des feineren Baus muß man die Trichosphaerien in Schnittserien zer- 

 legen. Die Einbettung erfolgte anfangs in Uhrschalen, später in meinem ]\liki'(iaquarium, welches 

 den Vorteil bietet, daß man sehr viele Exem|)lare auf engem Kaume zusammen einbetten kann. 

 In bequemerer \\'eise erreiche ich dies in neuerer Zeit durch Anwendung einer Zentrifuge. 

 Mehrere hundert Individuen können zugleich behandelt werden, ohne daß man Gefahr läuft, bei 

 den verschiedenen Manipulationen, wie Färbung, Alkoholweclisel, Paraffineinbettung, auch nur ein 

 einziges Tier zu verlieren. Nach der Fixierung werden die Tiere in einen kleinen Glaszylinder 

 (Präparatenglas) gebracht, in dem sie weiter behandelt werden; vor jedem Flüssigkeitswechsel 

 wird zentrifugiert, wodurch die Tiere auf dem Boden des Gläschens dicht zusammengedrängt 

 werden. Nachdem sie mit Paraffin ilurchtränkt sind, läßt man das (Tläsclien im Wasser schnell 

 erkalten, wodurch sich das erstere von der Glaswand zurückzieht. Durch Zerschlagen des 

 Zylinders erhält man einen schnittfertigen Paraffinbloi'k, in dem die Trichosphaerien so dicht 

 liegen, wie man es ohne Zentrifuge nicht erreichen kann. 



Das Schneiden der Rhizopoden ist bisweilen, wenn zahlreiche spröde Plasma-Einschlüsse 

 vorhanden sind, recht schwierig. Um sehr dünne (1 — 2 fi) Schnitte zu erhalten, habe ich dann 

 die von Heider angegebene Methode des Überstreichens des Paraffinblneks mit Mastixkollodium- 

 lüsung benutzt. 



Bei Schnittfärbung gelingt es leicht, mit Alaunkarmin, Boraxkarmin, C'ochenilletinktur, 

 E'uchsin, Safranin, Thionin, Kernschwarz gute Färbungen der Kerne zu erhalten. Eine lange 

 Färbung (24 — 36 Stunden) mit verdünntem Grenadier sehen Haematoxylin und Ausziehen mit 

 salzsaurem Alkohol habe ich ebenfalls mit Erfolg angewendet. Sehr schöne Bilder lieferte eine 

 Doppelfärbung mit Methylenblau und Brasilin, wobei ich in folgender Weise verfuhr: die auf 

 Wasser gebrachten Schnitte kommen für 5 IVlinuten in eine wässerige Methylenblaulösung (konzen- 

 triert), werden hierauf gut mit Wasser abgespült und auf einen Tag in Brasilin gebracht. (Die 

 Herstellung der von mir benutzten Brasilinlösung ist früher [96] bereits angegeben.) Nachdem 

 sie einige Stunden in 43 prozentigem Alkohol ausgewaschen sind, werden sie durch die Alkohol- 

 stufen auf Xylol gebracht und in Kauadabalsam eingeschlossen. Mit dieser Färbung sind alle 

 Fremdkörper, Fäkalien usw. blau, das Plasma rosa und die Kerne leuchtend rot gefärbt. Es 

 scheint, als ob diese Doppelfärbung Ähnliches leistet, wie die von Rhumbler angegebene Methyl- 

 grün-Eosinmischung für andere Rhizoi)oden. Bei Trichosphaerium habe ich mit dieser Doppel- 

 färbung keine so guten Resultate gehabt, wie bei andern Rhizopoden. Endlich habe ich als 

 vorzügliche Kernfärbuug bei Trichosphaerium auch die Benda-Heidenhainsche Eisenhaematoxylin- 

 färbung benutzt. 



Als Einschlußmittel wurden aijßer Kanadabalsam und Dammarharz für bestimmte Zwecke 

 (Studium der Hülle, achromatische Kernsubstanz) auch Glyzerin und essigsaures Kali angewendet. 



Zum Auffinden bestimmter Entwicklungsstadien auf Deckglaskulturen und in Schnittserien 

 ist ein verschiebbarer Objekttisch mit Nonien unentbehrlich. Ich benutzte einen solchen von Seibert. 



Zur Untersuchung der feinsten Organisationsverhältnisse stand mir ein Zeiß scher Apo- 

 chromat, Ap. 1,30, 2 mm Brw. und die Kompensationsokulare 4—12, für noch stärkere Vergröße- 

 rungen das vorzügliche Seibertsche apochromatisch-homogene Immersionssysteni, Ap.1,35, Brw. 2mm, 

 nebst den Kompensationsokularen 1, 4, B, 8, 12, 18 zur Verfügung. Als Lichtquelle wurde außer 

 Tageslicht Gasglühlicht, und für ilie stärksten Vergrößerungen Zirkonlicht benutzt. 



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