280 Beiträge zur Keiiiituis der Bakterien und verwandter Organismen. 



Filtrierpaiiier, nm ihn der Länge nach aufzuschneiden; während man nun ein Tröpfchen des 

 Darminhalts auf einen anderen Objektträger bringt und mit der Kapillare die Bazillen heraus- 

 fischt, sickert aus dem Best des Darminhalts so viel durch das Filtrierpapier hindurch, daß 

 das darunter befindliche Deckglas mit einer dünnen Flüssigkeitsschicht bedeckt ist. Man ent- 

 fernt nun vorsichtig das Filtrierpapier, indem man es mit dem Darminhalt senkrecht abhebt 

 und bläst den Inhalt der Kapillare auf die Flüssigkeitsschicht. Das Deckglas wird dann sofort 

 auf die feuchte Kammer gelegt und untersucht. Mit einiger Übung geht die ganze Manipulation 

 sehr schnell. Bei gut gelungenem Präparat bleiben die Bazillen oft 10 — 12 Stunden gut be- 

 weglich, die Teilung geht, wenn begonnen, normal weiter, ebenso die Sporenbildung. 



In ähnlicher A\'eise verfuhr ich auch bei dem Studium der Auskeimung der Sporen. 

 Die trockenen Faeces, in denen ich das Vorhandensein der Sporen festgestellt hatte, wurden 

 fein gerieben und etwas von dem Pulver in die filtrierte Darmflüssigkeit gebracht. Die Aus- 

 keimung begann dann bei einzelnen Sporen meist nach 2 — 3 Stunden. Eine weitere Entwicklung 

 der ausgekeimten Bazillen konnte ich aber nicht erreichen. Stets starben sie nach 8 — 10 Stunden 

 ab, während bei der künstlichen Infektion des Darmkanals der lebenden Schaben stets eine 

 lebhafte Wachstums- und Teilungsperiode der ausgekeimten Bazillen zu konstatieren war und 

 erst nach 2 — 3 Tagen die Sporenbildung einsetzte. Es empfiehlt sich auch zum bequemen 

 Studium der Auskeimung die Verfütterung der Sporen an nicht infizierte Schaben, weil im 

 Darmkanal der Prozentsatz der auskeimenden Sporen ein größerer ist (cf. den Abschnitt über 

 die Auskeimung der Sporen). Ebensowenig wie in dem Darmsaft außerhalb des Körpers der 

 Schabe, gelang mir die Zucht des Bacillus auf künstlichen Nährböden. Da aber die Isolierung 

 der Stäbchen wie Beobachtung der Entwicklung derselben auch ohne Reinkulturen ohne 

 Schwierigkeit zu bewerkstelligen war, habe ich niclit viel Zeit auf diese Experimente verwendet 

 und verzichte daher auf eine eingehende Schilderung meiner negativen Befunde. 



Die Konservierung der Bazillen und Anfertigung der Dauerpräparate erfolgte nicht 

 nach den in der Bakteriologie üblichen Trockenmethoden, sondern nach dem in der Protozoen- 

 forschung in neuerer Zeit angewandten Verfahren, auf feuchtem Wege. Im wesentlichen be- 

 diente ich mich der Methode, welche ich bei dem Studium der jjarasitären Protozoen, besonders 

 der Goccidien schon eine Eeihe von Jahren mit Erfolg benutzt habe. Ich verweise auf die 

 ausführliche Darstellung, welche ich in meiner Arbeit über Coccidium schubergi (Zool. Jahrb. 

 V. 13 1900 S. 207) gegeben habe. Die Ausstriche des Darminhalts wurden in derselben '\\"eise 

 wie dort geschildert angefertigt. Zur Fixierung der Ausstriche wurden die verschiedensten 

 Flüssigkeiten probiert. Am besten wirkten für die Bazillen, ebenso wie für die von mir untersuchten 

 Protozoen, heißer Sublimatalkohol in der von mir angegebenen Mischung (2 Teile konzentrierte 

 wässerige Sublimatlösung und 1 Teil Alcohol absolut.) und Osmiumsäuredämpfe. Diese beiden 

 Mittel ergaben weder Schrumpfung noch Quellung der ziemlich empfindlichen Bazillen. Essig- 

 säurezusatz zu der Sublimatmischung, der für viele Organismen empfehlenswert ist, brachte bei 

 den Bazillen störende Quellungen hervor. 



Starker Alkohol führte fast regelmäßig zur Plasmolysierung des Inhalts der Bakterien- 

 zelle. Auch die sonst vorzügliche Dienste leistende Herrmann sehe (Platinchlorid-Osmiumessig- 

 säure) und Flemmingsche (Chrom-Osmiumessigsäure) Lösung bewirkte Kunstprodukte an den 

 Bakterien. Die verschiedenen Pikrinsäuremischungen wirkten durchweg schlecht. Die übliche 

 Trockenmethode wurde nur für die Geißelfärbung nach Löffler angewandt, für das feinere 

 Studium des Inhalts der Bazillen ist sie ganz unbrauchbar. 



Die mit heißem Sublimatalkohol fixierten Deckglasausstriche des Darminhalts werden 



