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;-5Q4 Beiträge zur Kenntnis der Baktfrien und verwandter Organismen. 



Material und Untersucbungsmethoden. 



Bacillus sporonema ist wie erwähnt eine marine Form; sie trat wiederliult in einem 

 Glase auf, das mit Meerwasser ans der Adria bei Rovigno gefüllt war. In meinen frisch an- 

 gesetzten Foraminiferenkulturen wurde sie nie beobachtet; in dem Glase, in welchem ich sie 

 entdeckte, trat sie erst nach längerem Stehen auf Als die Ulven, die zur Sauerstoffproduktion 

 hineingesetzt waren, anfingen zu zerfallen und nach Verlust des Chlorophylls sieh in gelbliche 

 gallertige Flocken auflösten, bildeten sich die Kahmhäutchen mit den Sporengeflechten des 

 Bacillus. Als Kulturflüssigkeit für die Isolierung des Bacillus wurde ein Dekokt der galler- 

 tigen Ulvenflocken in Seewasser verwendet. In einer Reagenzröhre wurden mehrere derartige 

 gelbe Flocken wiederholt in Seewasser aufgekocht, die Flüssigkeit dann filtriert, wieder ge- 

 kocht und steril aufbewahrt. 



Die Isolierung der Bazillen geschah in folgender Weise: ]\Iit einem Deckglase wurde 

 das Kahmhäutchen mit den Sporenfilzen von der Oberfläche des Seewassers abgenommen. Dann 

 ließ ich es an der Luft trocknen und suchte mit einem starken Trockensystem eine Stelle aus, 

 an der nur die spindelförmigen Sporen in größeren Haufen zu beobachten waren. Mit einer 

 fein zugeschmolzenen Glasnadel, die an der Spitze naßgemacht war, sprengte ich ein kleines 

 Stückchen des Sporenfilzes vom Deckglase ab und übertrug es in einen ganz winzigen Tropfen 

 der Nährlösung, der so klein war, daß er auf der feuchten Kammer mit Immersion ganz über- 

 sehen werden konnte. Mit den Glasnadeln wurden die Sporen auseinander gezerrt und mög- 

 lichst gleichmäßig in dem Tropfen verteilt. Jetzt wurde dieser bei lOOOfacher Vergrößerung 

 genau durchmustert und die Kultur verworfen, sobald sich auch nur die Andeutung eines nicht 

 zu den Spindeln gehörigen Körjjers darin fand. Waren nur Sjiindeln vorhanden, dann wurde 

 der Tropfen durch Zufügung von reiner Nährlösung vergrößert. Als ich erst eine Stammkultur 

 hatte, wurde stets nur von dieser auf neue feuchte Kammern überimpft. Der Beweis der ge- 

 lungenen Reinkultur wurde dadurch erbracht, daß in den Kammern nach ihrer Eintrocknung 

 nur Spindeln zu finden waren. 



Für die Beobachtung der beweglichen Stadien des Bacillus wurden Präparate mit sehr 

 kleinen Mengen von Flüssigkeit benutzt, man kann dann die Stäbchen durch den Deckglas- 

 druck gelegentlich festlegen. Die Fixierung und Färbung der Präparate ist nicht schwierig, 

 weil die Kahmhäutchen mit den Sporen und Bazillen auch in Flüssigkeiten am Deckglas 

 haften bleiben. 



Trockenpräparate wurden meist nur für die Geißelfärbung verwendet. Zum Studium 

 des feineren Baues der Bazillen halte ich sie für ungeeignet; sie liefern zu viele Knnstprodukte. 



Sehr gut ist die Fixierung mit Osmiumdämpfen. Hierbei wurde 27o Osmiumsäure in 

 einer Uhrschale erhitzt bis sichtbare Dämpfe aufstiegen, und das nasse Deckglas mit den 

 Bazülen einige Sekunden darüber gehalten, dann sofort in 'Wasser ausgewaschen, in langsam 

 steigendem Alkohol gehärtet, in beliebiger ^\'eise gefärbt und schließlich eingeschlossen. 



Die Färbung fällt noch besser aus bei Fixierung mit heißem Sublimatalkoholil (2 Teile 

 konzentrierte wässerige Sublimatlösung und 1 Teil Alkohol absolutus). Im übrigen verweise ich 

 bezüglich der Fixierungs- und Färbungsmethoden auf meine erste Bakterienarbeit: bei der vor- 

 liegenden Form wurden dieselben ebenso angewendet. Die beste Färbung ergab wiederum die 

 Heidenhainsche Eisenhämatoxylinmethode, die die mannigfaltigsten Variationen und Abstufungen 

 der Tinktion ermöglicht; alle im Leben sichtbaren Struktureinzelheiten ließen sich mit dieser 

 Methode deutlicher machen. 



