Fixatie. Nadat de gewenschte tijd verloopen is, dus bv. na 5 minuten, 

 decanteert men, giet een groote overmaat van absolute alcobol op en 

 roert snel om. Onmiddelijk na de toevoeging wordt de alcobol door bet 

 uitgetrokken cbloropbyll groen en dit bewijst dus, dat de fixatie zeer 

 snel gaat. Deze fixatie is zeer fraai, niet de minste contractie vindt plaats, 

 toch is voor sommige détails eene nog betere fixatie gewenscht : daarvoor 

 gaf mij de sterke Flemming bet beste resultaat. 



Preservatie. Eerst met 75 °/ alcobol zoolang uittrekken tot de eieren- 

 massa volkomen wit is, daarna bewaren in alcobol van 92 %. 



In parafine brengen. Eerst in alcobol van 96% (absolute overbodig), 

 daarna in een mengsel van gelijke deelen absolute alcobol en origanum- 

 olie (olie van Origanum vulgare), dan in origanumolie, vervolgens in 

 oplossingen van 15, 30, 45, 60, 75 en 90 % parafine in origanumolie, 

 in ieder 10 minuten, dan een half uur in parafine, parafine gedecan- 

 teerd en door versche parafine vervangen. Bij het verdere proces worden, 

 bij een apotheker gekochte, gelatine capsules gebruikt. Men giet nu 

 zooveel parafine van de eieren af, dat juist genoeg overblijft om een zeker 

 aantal dier capsules te vullen. De capsules bevinden zich, evenals de rest, 

 in het parafine stoofje en staan in, met een kurkboor geboorde, gaatjes 

 van een groote platte kurk. Met een pipetje zuigt men nu de eieren 

 en de parafine op, verdeelt ze over de aanwezige capsules, sluit het para- 

 fine-stoofje weer en laat nog eenige minuten staan. Men zet dan snel 

 de dopjes op de capsules, zet de kraan der waterleiding open, neemt een 

 capsule in de hand, schudt die krachtig om, ten einde de eieren gelijk- 

 matig door de parafine te verdeelen en laat de parafine in den water- 

 straal stollen. 



Klaarmaken der par afineblokjes. Laat men de capsules een uurtje in 

 water drijven dan laat de gelatine los en kan men de parafine-cilin- 

 dertjes, die elk honderden eieren bevatten, er uitnemen, daar de gelatine 

 zacht geworden is. Men snijdt de cylindertjes nu vierhoekig af, kleeft 

 ze op den blokdrager van het microtoom en kan nu microtoomsneden 

 van elke gewenschte dikte vervaardigen. 



Opplakken der doorsneden. Op de gewone wijze met eiwit, doch op 

 de eiwitlaag een laagje gedestilleerd water, daarop de doorsneden ; zijn deze 

 gerimpeld, dan kan men ze door zacht verwarmen gemakkelijk glad maken. 



Kleuring, a. Voor het eenvoudig aantoonen van het spermatozoon is 

 verreweg het beste alcoholische carmijn bereid naar het voorschrift van P. 

 Mayer. Wat is nl. het geval? De bij massa's in het Fucus-ei aanwezige chro- 

 matophoren lijken in hooge mate op het ingedrongen spermatozoon en bijna 

 alle kleurstoffen kleuren beide in gelijke mate terwijl de bedoelde alcoho- 

 lische carmijn alleen het spermatozoon kleurt, niet de chromatophoren. 



b. De versche spermatozoon kunnen bet best gefixeerd worden met 

 osmiumdampen en daarna gekleurd met sterk verdund, methylgroen- 

 azijnzuur. Hiermede laat zich aantoonen, dat het spermatozoon een vol- 

 komen cel is, die uit plasma, 2 ciliën, 1 kern en 1 of 2 chromatopho- 

 ren bestaat. 



Verkregen resultaten. De bevruchting, inclusieve de indringing van 

 het sperinatozoon, laat zich gemakkelijk aantoonen, eveneens het feit, dat 

 het spermatozoon tot zéér dicht bij de kern van het ei komt. De resul- 

 taten van Farmer worden dus bevestigd. Verdere resultaten wil ik liever 

 nog niet mededeelen, daar er nog te veel onzeker is en eerst na bewer- 

 king van het onlangs verkregen materiaal kan worden vastgesteld. Wel 

 wil ik vermelden, dat het doel van het onderzoek is na te gaan, in hoe 



