XL 



gewone wijze gefixeerd, welwillend ter beschikking gesteld. Het duurde 

 langen tijd, voordat bruikbare resultaten verkregen werden. Na bleeken 

 volgens Spaltehülz was er van kraakbeenkleuring zoo goed als geen 

 spi'ake meer. Toen werd zonder bleeken de huid er af gepraepareerd ; 

 ook de oogen werden steeds verwijderd; nog was de uitslag niet gunstig. 

 Wel werd het geraamte van kop, vinnen en staart prachtig blauw, maar 

 niet de wervelkolom. Ook na verwijdering van de ingewanden scheen 

 de kleurstof nog te sterk door de spieren te worden tegengehouden, 

 want zooals het mooi doorzichtige praeparaat duidelijk liet merken, de 

 wervelkolom was veel te zwak blauw. Daarom werd nu een verzadigde 

 oplossing gemaakt van Victoriablauw in alcohol van 96 "/q , waarin het 

 veel sterker oplost dan in alcohol van 64"/,, Spr. behoeft er wel niet 

 opmerkzaam op te maken, dat ook met Methyleen blauw de noodige 

 proeven genomen werden, doch met even weinig succes. 



In de Victoriablauwoplossing in alcohol van 96 '^/q werden nu 2 van 

 de grootste embryonen — 16 cM. — gebracht en 2 tot 3 weken er in ge- 

 laten; uittrekken en doorzichtig maken, het ging alles even voorspoedig 

 en ieder kon zich overtuigen, dat het resultaat schitterend genoemd 

 mocht worden. Bleeken was hier niet noodig, omdat er bijna geen pig- 

 ment meer aanwezig was. Zelfs kleine bijzonderheden, als openingen in 

 schedel, ledemaat-skelet en intercalaria voor bloedvaten en zenuwen zijn ook 

 met het bloote oog zichtbaar. Toch zijn ook thans nog niet alle moei- 

 lijkheden overwonnen. Immers bij ongeveer 12 cM. lange embryonen wordt 

 het kraakbeen der wervelkolom nog niet sterk genoeg gekleurd. Aan 

 doorsneden er van, op het objectglas met dezelfde oplossing gekleurd, 

 laat spr. zien, dat het kraakbeen toch wel aanwezig is : de spieren zijn 

 dus blijkbaar ook voor deze oplossing nog niet genoeg doordringbaar. 

 Wellicht dat een zeer lang verblijf in de oplossing uitkomst geeft; ver- 

 dere proeven zullen dit moeten leeren. 



Den eersten tijd na het doorzichtig maken zijn de spieren prachtig wit, 

 na verloop van tijd worden ze geelachtig, iets waarop Spalteholz ook 

 wijst: toch blijven de praeparaten zeer mooi. In tegenstelling met ceder- 

 houtolie (zie Diss. bl. 5) vernietigt de oplossing van Spalteholz, voor 

 zoover spr. uit ondervinding kan spreken, de blauwe kleur niet: de 

 Mo/gfe-larve, waarvan boven sprake was, heeft reeds 4 jaar lang de kleur 

 onverzwakt bewaard. 



Ten slotte geeft spr. nog een verklaring, waarom aan Victoriablauw 

 de voorkeur gegeven wordt boven Methyleenblauw. Ten eerste omdat 

 het Victoriablauw hemelsblauw is. terwijl het Methyleenblauw een eenigs- 

 zins naar het zwart zweemende tint geeft. De voornaamste reden is 

 evenwel deze, dat, althans bij /4can</iias-embryonen en dus vermoedelijk 

 ook bij andere, het niet noodig is om na fixatie fe jodeeren en uit te 

 trekken met zoutzuren alcohol, hetgeen veel tijd en alcohol spaart. Wel 

 was een embryo met een laagje fijn poeder bedekt, maar dit kon er met 

 een penseel gemakkelijk afgeborsteld worden en het ontkleuren kostte 

 niet meer tijd dan anders. Bracht men een embryo op dezelfde wijze in 

 Methyleenblauw, dan zou niet alleen de buitenkant met kristalletjes en 

 poeder bezet zijn, maar ook de inwendige holten. Het kan dan maanden 

 duren, eer men ze door uittrekken met dagelijks ververschten alcohol 

 verwijderd heeft. 



Een antwoord op de vraag, waarom niet gebbekt werd met KMnO^- 

 oplossing, werd reeds vroeger gegeven (Diss. bl. 3). Immers toen werd 

 opgemerkt, dat de KMn04-oplossing zeer moeilijk doordringt. Het zou 



