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Gearbeitet wurde in den meisten Fällen mit frisch bereiteten Organextrakten. Diese wurden 

 in der Weise hergestellt, daß abgewogene Mengen des Organs entweder allein oder unter Zugabe von 

 Quarzsand oder Glaspulver in der Reibschale möglichst gründlich verrieben wurden. Darauf wurden 

 sie mit einem abgemessenen Quantum destillierten Wassers versetzt, einige Zeit (V2 bis mehrere 

 Stunden) stehen gelassen, abfiltriert und mit etwas Chloroform im Eisschrank aufbewahrt. Chloro- 

 form hat keinen schädlichen Einfluß, wie mehrfach durch besondere Versuche festgestellt wurde. 

 Extrakte, die bei niedriger Temperatur mit Chloroform aufbewahrt werden, behalten im allgemeinen 

 ihre Aktivität gut bei, wenn auch im einzelnen erhebliche Unterschiede existieren. 



In vielen Fällen haben wir auch, um die Katalaselösung möglichst von Verunreinigungen zu 

 befreien, eine Fällung der ursprünglichen Extrakte vorgenommen. Dies geschah nach dem Vorgange 

 von Senter in der Weise, daß die Lösung zunächst mit dem gleichen Volumen 96prozentigen Alkohols 

 versetzt wurde. Der sich bildende Niederschlag wurde abzentrifugiert, auf dem Büchnerschen Trichter 

 nochmals mit 50 prozent. Alkohol abgespült und abgesaugt, dann getrocknet und mit destilliertem 

 Wasser extrahiert. Zur Vervollständigung der Extraktion wurde häufig V2 — 1 Stunde auf der Schüttel- 

 maschine geschüttelt, wodurch sich aktivere Lösungen gewinnen ließen. Doch gelang es nicht, dem 

 Niederschlag durch einmalige Extraktion alle Katalase zu entziehen, vielmehr ergaben weitere Extrak- 

 tionen mit neuem dest. Wasser Lösungen, die noch deutlich, wenn auch schwächer aktiv waren. 



In vielen Fällen war das Filtrat der alkoholischen Lösung inaktiv, in anderen dagegen noch 

 stark aktiv. In solchen Fällen konnte durch Zusatz weiteren Alkohols neue Fällung hervorgerufen 

 werden, die dann den größten Teil der Katalase enthielt, z. B. Leber von Hund und Schwein, Fett, 

 Puppen von Malacos. neustria. Manchmal bedurfte es des 3 — 4fachen Volumens 96prozentigen 

 Alkohols, bis alle Katalase ausfiel (Insekten). Auffällig war dabei die große Resistenz der Katalase 

 gegen Alkohol; die alkoholischen Lösungen, welche oft sehr schwer vom Niederschlag zu trennen 

 waren, konnten 24 Stunden und länger stehen, ohne an Aktivität merklich abzunehmen. 



Ein vorzügliches Mittel zur Reinigung ist das Ausschütteln der Katalaselösungen mit Ad- 

 sorptionsmitteln wie Tierkohle, Kaolin, Bolus alba usw. Man erhält dadurch schon nach wenigen 

 Minuten sehr reine, völlig wasserklare Lösungen. Leider zeigt sich aber, daß auch die Katalase dabei 

 adsorbiert wird und zwar, soweit wir bis jetzt gesehen haben, von positiv wie negativ geladenen 

 Adsorbentien. Bei sehr aktiven Extrakten, z. B. Puppen von Deil. euphorbiae, gelingt es auf diese 

 Weise eine reine Lösung zu erhalten, in welcher die Katalase zwar stark geschwächt ist, aber ihre 

 früheren Eigenschaften beibehalten hat. 



Die eigentliche Untersuchung auf Katalase geschah in fast allen Fällen durch Titration mit 



Kaliumpermanganat. Es wurde zu diesem Zweck eine bestimmte Menge des Extraktes mit destill. 



Wasser auf 100 — 500 ccm verdünnt und dazu Wasserstoffsuperoxyd gefügt. Meist wurde ein Gehalt 



von 4 — j^ n H2O2 in der Mischung gewählt. Die Peroxydlösung wurde durch Verdünnen von 



Merckschem Perhydrol mit destill. Wasser hergestellt. Aus dem Gemisch wurden in bestimmten 



Intervallen Proben von gleicher Menge (10 — 50 ccm) entnommen und in Kölbchen mit verdünnter 



Schwefelsäure pipettiert, wodurch die Reaktion sofort zum Stillstand kommt. Darauf wurde die 



Menge des noch vorhandenen Wasserstoffsuperoxyds durch Titration mit einer ^^,^^ n Kaliumper- 



manganatlösung bestimmt. Es wurden stets eine Reihe von Bestimmungen ausgeführt und danach 



die Konstanten der Reaktion berechnet, nach der Formel für die Reaktion I. Ordnung: 



1 Gl 



0,4343 . K = -— ^ log - 



Zoologica. Heft 07. •^>'> 



