— 10 — 



der jungen Embryonalstadien aber ist die genaue Orientierung und am besten auch die Isolierung 

 der Objekte dringend erforderlich. Ich griff deshalb nun zum Mittel der Präparation. Die Eier und 

 Embryonen mußten aus der Mutterlarve herauspräpariert und für sich fixiert werden. 



Die Präparation geschieht unter der binoculären Lupe. Man bringt die Mutterlarven in 

 physiologische Kochsalzlösung, faßt sie mit feinen Präpariernadeln am vorderen und hinteren 

 Körperende und reißt sie mit einem Euck auseinander. Dabei fallen die Embryonalstadien größten- 

 teils von selbst isoliert heraus, etwa zwischen den Organen der Larve zurückgebliebene Eier können 

 durch weiteres Zerzupfen befreit werden. Die herauspräparierten Objekte werden darauf mit einer 

 feinen Kapillarpipette angesaugt und in die bereitgestellte Fixierlösung eingebracht. 



Als Fixiermittel habe ich jetzt nur noch Flemming'sche Lösung und Formol-Alkohol-Essig- 

 säure verwendet, das letztere in folgender Zusammensetzung: 



30 Teile Wasser, 

 15 Teile 96« „ Alkohol, 

 6 Teile Formol, 

 1 Teil Eisessig. 



Die beiden Lösungen ergänzen sich in ausgezeichneter Weise, und ich habe damit ganz vor- 

 zügUche Präparate erhalten. Für die späteren Embryonalstadien ist Flemming'sche Lösung nur 

 wenig geeignet, und es ist hier Formol- Alkohol-Essigsäure bei weitem vorzuziehen. Man erhält mit 

 diesem Fixiermittel sowohl sehr distinkte Kernfiguren, als auch sehr klare IHDersichtsbilder, und 

 außerdem bleibt der Dotter hell und ungefärbt und läßt also die darinliegenden Bildungselemente 

 deutlich hervortreten. Für Flemming'sche Lösung genügt die Einwirkung von 24 Stunden, ein noch 

 längeres Fixieren läßt keine besonderen Nachteile, aber auch keine Yorteile erkennen. Formol - 

 Alkohol-Essigsäure habe ich etwa 5 Stunden einwirken lassen. Das Überführen der Objekte habe 

 ich mir auf folgende Art erleichtert. Ich verwendete kleine Tuben von etwa 5 cm Länge imd 1 cm 

 Dicke, diese füllte ich etwa zur Hälfte mit der Fixierlösimg und spritzte die in die Kapillarpipette 

 gesaugten Eier imd Embryonen hinein. Man kann so in einem Tubus sehr viele der kleinen Objekte 

 fixieren. Die Verdünnung der Fixierlösung, welche durch das wiederholte Hinzubringen der physio- 

 logischen Lösung herbeigeführt wird, kann durch Absaugen und abermaliges Zugießen der ursprüng- 

 lichen Lösung ausgeglichen werden. Der Tubus wird zuletzt bis obenan gefüllt und mit feiner Gaze 

 abgebunden und darauf in einen großen Tubus gestellt, worin nun die ganze Überführung geschieht. 

 Man gießt einfach die verscliiedenen Alkohole in den großen Tubus, aus dem sie durch die Gaze in den 

 kleinen übertreten. Die Diffusion geschieht dabei sehr allmähUch, was wieder für die Konservierung 

 von großem Vorteil ist. Da das Volumen des kleinen Tubus nur gering ist, wird keine beträchtliche 

 Verdünnung der zugegossenen Alkohole bewirkt. Beim Wässern der mit Flemming' scher Lösung 

 fixierten Objekte muß man den kleinen, abgebundenen Tubus horizontal legen, damit das ganze 

 Fixiermittel entfernt wird. Ich habe das Wässern auf 24 Stunden ausgedehnt. 



Beim absoluten Alkohol angelangt, wurden die Objekte aus dem kleinen Tubus in die bekannten 

 ausgehöhlten Glaswürfel umgeschüttet. Da sie meist an den Wänden des Tubus klebten, mußten sie 

 erst mit einem weichen Pinsel gelockert werden. Ich habe sie dabei selten verletzt. In dem Glas- 

 würfel kann man unter der binoculären Lupe den Alkohol noch einmal absaugen und frischen absoluten 

 Alkohol zugießen. Darauf erfolgt die Überführung in Nelkenöl. Ich habe sie ebenfalls ganz allmählich 

 ausgeführt, indem ich zunächst eine Mischung von halb Nelkenöl und halb absolutem Alkohol tropfen- 

 weise zufügte und oben die Flüssigkeit im Glaswürfel immer in kleinen Mengen absaugte. Lagen dann 



