LE NATURALISTE 



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Les anciennes cultures sur bouillon, et les cultures 

 sur gélatine et sur gélose au bout do quelques se- 

 maines, présentent en assez grande quantité, des élé- 

 ments ronds, de 0™"'0004 à û°""0006 de diamètre, très 

 clairs,plus mobiles que les bâtonnets et qui semblent 

 être les spores de la Bactérie, ^ous n'avons jamais re- 

 trouvé ces formes dans les organes malades des gre- 

 nouilles. 



Pour déceler le microbe dans les différents viscères 

 de ces animaux, on peut se servir avec avantage de la 







Fig. 3. — Culture sur 

 gélose après trois se- 

 maines — a, (ormi bac- 

 térienne ; b, spore. 



Fig, 4 —Aspect de la culture sur 

 plaque ; a, après 30 heures; gr. 20 — 

 p, après 48 heures, gr. 8. 



méthode des cultures sur plaques. On dilue une goutte 

 de sang, sérosité, etc., dans une certaine quantité de 

 gélatine nutritive fondue vers 2o°, et on l'étend sur une 

 plaque de verre où elle ne tarde pas à se solidifier. Les 

 microbes ainsi isolés, donnent naissance à des colonies 

 très petites au bout de 2î heures, mais qui augmentent 

 rapidement. 



Ces colonies sont d'abord circulaires, granuleuses 

 et homogènes. A partir du deuxième jour, le dévelop- 

 pement est très rapide et la plaque de gélatine est 

 liquéfiée en quelques heures. 



Mais, si on laisse alors les plaques à une température 

 de quelques degrés seulement au-dessus de 0, le déve- 

 loppement se fait plus lentement et on peut saisir le 

 stade représenté en 7; dans la figure 4 : à la périphérie 

 la culture est presque claire, d'autant plus limpide 

 qu'on approche plus des bords, et, à égale distFmce de 

 la circonférence et du centre, oi voit une auréole 

 floconneuse assez large. 



Au moyen de ces colonies développées sur plaques, 

 on peut ensemencer des matras de l)ouillon et essayer 

 des cultures sur les différents milieux employés à "cet 

 effet. 



La Bactérie se développe très bien dans du Ijouillon 

 de veau neutralisé. Au bout de dix heures on com- 

 mence à voir un léger trouble dans toute la masse; 

 ce trouble s'accentue rapidement et un dépôt flocon- 

 neux tombe au fond du matras. Ce dépôt augmente 

 toujours et au bout de trois mois, il atteint une" épais- 

 seur de plusieurs millimètres. Il ofl're une coloration 

 jaunâtre, qui tire sur le brun, surtout dans les couchog 

 inférieures. 



La culture la plus caractéristique est la culture en 

 tubes de gélatine. Voici les caiactères que présentent 

 les tubes inoculés et maintenus à 22" G. 



En déposant simplement une goutte du liquide séro- 

 sanguinolent obtenu par l'incision antiseptique du 

 membre malade, à la surface d'un tulie de gélatine 

 peptonisée, on voit, au bout de quatre heures," la sur- 

 ace se déprimer et, vers la dixième heure il s'est formé 

 une cupule de liquéfaction mesurant deux à trois mil- 

 limètres de profondeur. 



Si on inocule le tube en faisant, avec un fil de pla- 

 tine stérilisé et chargé de liquide contenant des 



microbes, une piqiire de deux ou trois centimètres, on 

 voit la liquéfaction se faire en entonnoir sur toute sa 

 longueur. Il en est de même si la piqûre atteint une 

 profondeur de huit à dix centimètres : la liquéfaction 

 se fait d'emblée sur tout son trajet; puis l'entonnoir 

 s'élargit et le tube en entier ne tarde pas à être 

 liquéfié. 



Fig. 3. — A, culture en tulif Fi;.' b. — C, tube rie gélatine 



Ile gélatine inoculé par ilépot inoculé par piqûre profonde 



d une goutte de sang, à lalO" heure après 24 heures —D, le même' 



-;- B, culture après l(j heures après 48 heures, 

 d'un tube inoculé par piqûre. 



II se fait jiu fond de lenlonnoir un dépôt grisâtre, 

 assez épais^ et le liquide de liquéfaction est trouble, 

 présentant de petits flocons. Ceux-ci, qui existent au 

 début dans toute la hauteur du liquide, tombent peu à 

 peu, mais très lentement, et le trouble de la partie 

 liquéfiée dure pendant plusieurs semaines. Le dépôt 

 n'est complètement tassé au fond du tube qu'au bout 

 de deux mois. 



Outre la fluidication do la gélatine, ce microbe l'al- 

 calinise assez fortement. Tandis que le milieu de cul- 

 ture stérilisé, rendu légè/ement alcalin par le carbo- 

 nate de soude, est complètement neutralisé avec 

 gr. 90 d'acide sulfurique (par litre), il faut aucon- 

 traire 1 gr- TU de cet acide pour le neutraliser, après 

 l'action de la bactérie. L'alcalinité du milieu est donc 

 presque doublée, après la liquiélaction de la gélatine. 

 Le développement rapide de la Bactérie tout le long 

 d'une piqûre à l'intérieur de la gélatine pouvait faire 

 supposer que la présence d'une grande quantité d'oxy- 

 gène n'était pas nécessaire à sa croissance. En effet, si 

 on inocule par piqûre un tube de gélatine nutritive 

 recouverte d'une couche d'huile, la Bactérie se déve- 

 loppe dans ces conditions, absolument comme elle le 

 faisait à l'air libre. D'ailleurs, les cultures conservées 

 pendant plusieurs mois dans un vide relatif sont aussi 

 virulents que les cultures jeunes. 



Après la culture sur gélatine, c'est la culture sur 

 pomme de terre qui est la plus caractéristique. Elle se 

 développe d'une façon aussi rapide et très ample, et 

 donne une masse assez épaisse, qui d'abord jaune prend 

 peu à peu en vieillissant une teinte bistre et devient 

 gluante. Elle possède une réaction alcaline qui l'em- 

 pêche ordinairement d'être envahie par les moisis- 

 sures quand on l'expose quelque temps à l'air. En 

 vieillissant, la culture sur pomme acquiert une odeur 

 désagréable et complexe où prédomine l'odeur du jus 

 de tabac. 



C'est sur pomme de terre que la Bactérie prend son 

 plus grand développement et acquiert toute sa viru- 

 lence. Des culture faites avec le sang d'une grenouille 

 malade et semées en cultiures successives surdos tubes 

 de gélose perdent sensiblement de leur vitalité au bout 



