Fixiennig- und Färbung der Protozoen. 25 



Färbung: 1. Celloidin-, Paraffin- oder Gefrierschnitte (Härtung nur in Alkohol 

 abs.) aus Wasser 20 — ^^40 Minuten in Farblösung erwärmen, dann Lösung schnell ab- 

 kühlen, 2. Abspülen in Wasser 1 — 3 Minuten, 3. rasch in Alkohol abs. entwässern, 

 4. Berganiottöl oder Xylol-Balsam. 

 BoRREL'sches Gemisch. 



Farblösung 1: Konz. wässerige Lösung von Magentarot, 

 „ 2: Konz. wässerige Lösung von Prikinsäure, 



,, 3: Wässerige Indigokarminlüsung. 



Färbung: Formol- oder sublimatgehärtete Schnitte kommen erst in Nr. 1, 

 dann in ein Gemisch von gleichen Teilen 2 + 3. 



ßomanowsky-Färbung. Diese Färbung, welche von Romanowsky zunächst nur 

 für die Darstellung der Malariaparasiten empfohlen war, hat in den letzten Jahren 

 für die gesamte Mikrobiologie große Bedeutung erlangt. Den Erfolg hat - sie der 

 außerordenthch kontrastreichen Wirkung zu verdanken, welche sie auf jedes Zell- 

 material, sei es tierischer oder pflanzlicher Herkunft, ausübt. Bei Trockenpräparaten 

 erscheinen die Kerne leuchtend rotviolett, das Plasma blau, andere Elemente präsen- 

 tieren sich in Mischfarben von blau und rot mit sehr distinkter, teilweise durch Meta- 

 chromasie hervorgerufener Abtönung; stark acidophile Einschlüsse erscheinen eosin- 

 farben. Auch die Färbungsintensität der Chromatin- und Chromidialsubstanzen 

 sowie vieler Granulationen erreicht durch kein anderes substantives Tinktions- 

 verfahren einen derartig hohen Grad wie durch die RoMAXowsKY-Färbung. 



Romanowsky selbst bediente sich bei der Färbung einer alten gereiften Methylen- 

 blaulösung, die er mit Eosinlösung in bestimmten Verhältnissen mischte und auf das 

 Präparat einwirken ließ. Im Laufe der Zeit wurden dann zahlreiche Versuche gemacht, 

 diese ursprüngliche Methode, die sich als recht unsicher herausstellte, zu verbessern, 

 so von ZiEMAXN, Nocet, Laveran, Rüge, Maurer, Reuter, Leishman, Michaelis, 

 Wright, Giemsa u. a. Die Grundlage, auf der sich die Färbung bis zu der Höhe, auf 

 der die heute steht, entwickelte, gab Nocht, und zwar durch den experimentellen 

 Nachweis, daß nicht das Methylenblau, sondern ein Zersetzungsprodukt desselben, 

 das sog. „Rot aus Methylenblau" bei der Chromatinfärbung die Hauptrolle spielt. 

 Hierdurch war der Weg zu der schließlichen Erkenntnis gegeben, daß das chromatin- 

 färbende Prinzip, wie Michaelis und Giemsa später feststellte, im ,, Methylenazur", 

 einem zuerst von Berxtsen beschriebenen Derivat des Methylenblau zu suchen sei, 

 welches bei dieser Färbung als amphochromes Farbsalz (Azur-Eosin) seine spezifische 

 Wirkung entfaltet. Mit der RoMANOWSKY-Färbung sind nicht jene Verfahren zu ver- 

 wechseln, bei denen ein amphochromes Farbsalz zur Anwendung gelangt, welches aus 

 frischer, unzersetzter also azurfreier Methylenblaulösung und Eosin resultiert, wie es 

 zuerst von Jexxer in die Praxis eingeführt und später von May-Grüxwald nament- 

 lich zur Granulafärbung der Leucocyten empfohlen wurde. Durch dieses Farbsalz 

 werden die Kerne der weißen Blutkörperchen und der Protistenzelle nicht 

 rotviolett, sondern blau gefärbt. 



Mit der theoretischen Seite des eigenartigen Prozesses, der sich bei der Roma- 

 xowsKY-Färbung abspielt und bei welchem 3 Farbstoffe von verschiedenen Elektions- 

 vermögen (Methylenazur , Methylenblau und Eosin) und teilweise metachroma- 

 tischen Eigenschaften (s. weiter unten) in Wechselwirkung treten , haben sich 

 bislang nur wenige Autoren beschäftigt. Michaelis läßt es im Zweifel, ob 

 die Rotreaktion der Kerne auf einer bloßen Metachromasie des Methylenazurs 

 beruht, zu deren Entstehung die Gegenwart des Eosin nur Anlaß gibt, oder ob 

 beide Farbstoffe, das Eosin und das Azur, bei der Färbung aktiv beteiligt sind. 

 Nach eigener Erfahrung ist letzteres, wie durch Successivfärbung festgestellt wurde. 



