28 (i- GlEMSA. 



a) Trockeiiausstriche. 



Gewöhnliche Methode: 



Härtung der lufttrockenen Ausstriche in Alkohol ab.-. 30 Minuten und länger, 

 oder schneller (2 — 3 Minuten) in Methylalkohol oder Alkohol abs. + Äther ää. Ab- 

 tupfen mit Fheßpapier. Übergießen der Präparate mit frisch verdünnter Giemsa- 

 Lösung (10 Tropfen auf 10 ccm Wasser), Mindestens 15 Minuten oder behebig länger 

 färben. Abwaschen im Wasserstrahl (Differenzieren in reinem Aceton, destilliertem 

 oder ganz schwach mit Essigsäure versetztem Wasser meist nur nach sehr langer 

 Färbung nötig), abtupfen, trocknen, Cedernöl. 



Sehnellfärbemethoden. (Besonders zur Darstellung der Spirochaete pallida): 



1. Vorsichtiges Fixieren des frischen, lufttrocknen Ausstrichs vorsichtig über 

 Spiritusflamme oder besser (2 Minuten) in Methylalkohol oder Alkoholäther ää. Bei 

 älteren Präparaten ist Fixierung entbehrlich. 



Herstellen verdünnter Farblösung (10 Tropfen GiEMSA-Lösung auf 10 ccm destil- 

 liertes Wasser). 



Übergießen des Ausstrichs mit einem Teil der frisch verdünnten Lösung. Über der 

 Flamme vorsichtig bis zur Dampfbildung erwärmen. ]Vach 14 Minute Farblösung 

 vom Präparat abgießen, einen weiteren, noch unbenutzten Teil der Lösung darauf 

 gießen, wiederum erwärmen, fortgießen und Prozedur ca. 4 mal wiederholen. Abtrocknen, 

 Cedernöl. 



2, Weit bequemer ist eine neuere von Giemsa angegebene Methode. 

 Farbmischung : Man verdünnt die käufliche Giemsalösung im Tropf fläsch- 



chen mit dem gleichen Volumen Aceton oder Methylalkohol reinster Qualität. (Für 

 die Tropen ist Aceton weniger zu empfehlen. — Mischung behält nur einige Tage 

 volle Farbkraft, daher nicht viel vorrätig halten). 



Färbung: Einlegen des lufttrocknen, sehr dünnen Objektträgerausstriches 

 (Schichtseite nach oben) in eine trockne Petrischale oder noch besser, in die eigens 

 für diese Färbung hergestellten Färbewännchen (bei Carl Zeiß, Jena und F. & 

 M. Lautenschläger, Berlin, zu haben). Aus dem Tropf fläschchen soviel Farb- 

 mischung auf das Präparat tropfen, bis dieses hiermit völhg benetzt ist (10 — 15 

 Tropfen). Eine halbe bis höchstens 1 Minute bei bedeckter Schale einwirken lassen. 

 Darauf soviel destilhertes, nötigenfalls vorher schwach alkahsiertes Wasser in die 

 Schale gießen, bis Objektträger ganz von Flüssigkeit bedeckt ist (10 — 12 ccm). Hin- 

 und Herschwenken bis Farblösung und Wasser homogen durchmischt sind. 3, bei 

 Trypanosomen oder Spirochäten (besonders pallida) 5 Minuten oder länger in dem 

 Gemisch belassen, Farblösung abgießen, Objekt mit Wasser abspülen, trocknen. 



b) Feuchtpräparate. 



Fixieren der sehr dünnen, noch feuchten Ausstriche in auf 60 — 70° erwärmtem 

 Subhmatalkohol nach Schaudinn (s. S. 11) 1 — 24 Stunden und beliebig länger, hierbei 

 Objektträger (Deckgläschen) mit nach unten gekehrter Schichtseite auf Lösung werfen, 

 nachher umdrehen. Die Lösung braucht nur beim Einlegen der Objekte warm zu sein. 



Abwaschen in Wasser oder 70 % igem Alkohol. 



10 Minuten lang in eine Lösung von Jodkali 2 g in dest. Wasser 100 g, welcher 

 3 ccm LuGOL'scher Lösung zugefügt wurden, oder — für die Erhaltung des Plasmas 

 (Granulationen) vorteilhafter — in sehr verdünnte Jodtinktur (1 ccm Tinktur auf 

 100 ccm Alkohol 70 % ig). Abwaschen in Wasser. 



10 Minuten lang in eine 0,2 — 0,5 % ige wässerige Lösung von Natriumthiosulfat. 

 Gut abwaschen in Wasser. 



Färben mit frisch verdünnter GiEMSA-Lösung (nach der ersten halben Stunde alte 



