Pathogene Trypanosomen. 261 



Geringes Bakterienwachstum beeinträchtigt zunächst die Trypanosomen kaum; 

 sobald es aber zu starker Vermehrung kommt, insbesondere durch Fäulnis, gehen 

 die Trypanosomen zugrunde. 



Das Überleben in Arthropoden, die nicht als Überträger in Betracht kommen, 

 durch Saugenlassen bzw. durch Impfung nicht stechender Arten, welch letzteres mehr 

 zu den ,, biologischen Unterhaltungen" gehört, braucht nicht besprochen zu werden. 



3. Die Kultur außerhalb des Tierkörpers. 



Die wirkliche Kultur von Trypanosomen außerhalb des Tierkörpers ist zuerst 

 NovY und Mc Neal (133) bei Inipanosoma lewisi, dann aber auch bei Tryjmnosoma 

 hrucei gelungen. 



Das Nährmedium dieser Autoren besteht aus: 



Extrakt von 125 g Rindfleisch in 1000 ccm Wasser, 



Agar 20 g, 



Pepton 20 g, 



Kochsalz 5 g, 



Normal NagCOs 10 ccm. 



Dieser fertiggestellte und bei ca. 55" flüssig in Reagenzröhrchen gehaltene Agar 

 wird dann mit entsprechenden Mengen steril entnommenen (aus Carotis oder durch 

 Herzpunktion) defibrinierten Kaninchenblut gemischt, die Röhrchen schräg gelegt 

 und erstarren lassen. 



Für Trypanosoma leirisi, die Trypanosomen der kleinen Säuger, und einige 

 Vogeltrypanosomen genügt nach unseren Erfahrungen dabei meist 1 Teil Blut zu 

 1 — 2 Teilen Agar. Für pathogene Trypanosomen ist ein Überschuß von Blut (2 : 1) 

 nötig; für letztere Fälle ist daher 21/9 % Agar wegen des besseren Erstarrens vorzu- 

 ziehen. Die erstarrten Röhrchen kommen für 24 — 48 Stunden in 37", damit sich 

 reichhch Kondenswasser absetzt. Die Impfung erfolgt mit einigen Tropfen oder Ösen 

 ins Kondenswasser. Die Röhrchen werden am zweckmäßigsten bei Zimmertemperatur 

 dunkel aufbewahrt. 



In diesen Kulturen kommt es im günstigen Fall zu einer enormen Vermehrung 

 der Parasiten, die dabei in mächtigen rosetten- bzw. morgensternartigen Haufen 

 besonders auf der Oberfläche des Kondenswassers wuchern; oft zieht sich die Kultur 

 auch als dicker feuchter grau erscheinender Belag die Agaroberfläche hinauf. 



Bei manchen Arten gelingt die Abimpfung von Kultur zu Kultur in vielen Gene- 

 rationen, bei anderen, besonders bei den wichtigsten pathogenen Arten aber gelingen 

 sowohl die Primärkulturen relativ selten, als auch das Wachstum meist spärUcher 

 ist und Subkulturen oft mißhngen. 



Alle Versuche, den Nährboden zu verbessern, sind bisher nicht gelungen; ins- 

 besondere hat sich noch keine Blutart gefunden (mit Ausnahme von Vogelblut für einige 

 Vogeltrypanosomen), die das Kaninchenblut mit Vorteil ersetzen kann. 



Bei Verunreinigung der Kulturen mit Bakterien war es Novy und Mc Neal 

 möglich, durch Gießen von Blutagar in PETRi-Schalen und Beimpfen isoherte Flagel- 

 latenkolonien zu erhalten; ich fand Eingießen in Kolben mit breitem Boden und Über- 

 schütten mit Blutagarkondenswasser vor der Impfung für sehr vorteilhaft zu dieser 

 Methode. 



Die Züchtung auf e i n f a c h e r e n Nährböden, nämhch auf gewöhnhcher 

 Nährl)()iiill(in. der 1 — 2 ccm des infizierten Blutes zugesetzt werden, ist bisher nur bei 

 gewissen Rindertrypanosomen gelungen, die zum Teil überhaupt durch diese Methode 

 entdeckt worden sind und zweifellos eine ganz besondere Stellung unter den 

 Trypanosomen einnehmen. Für andere Trypanosomenarten, auch nichtpathogene, 

 ist die ]\Iethode bisher erfolglos geblieben. 



