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hob noch u. a. hervor, daß man insbesondere in Originalkiiltur erster Tage fast aus- 

 nehmend den Typus der ..Refringens" vorfindet, während weitere Generationen sowie 

 ältere Originalkultureu in unzweideutiger "\Veise eine Überzahl von Spirochäten ent- 

 halten, die allen für die Spirochaeie pollida festgelegten Merkmalen ent- 

 sprechen. MÜHLEXS beobachtete häufig das umgekehrte Verhalten: in den ersten Ge- 

 nerationen überwiegend ..Palhdatyp", von der 3. — 5. Generation an ..Refrinsjenstyp", 

 abgesehen von den Kulturen, in denen der ursprüngliche Refringens- bzw. Pallidatyp bei 

 den "Weiterimpfungen unverändert bheb. — Mühlens glaubte nicht an die Umwand- 

 lung eines Typs in einen anderen, sondern nahm das ursprüngliche Vorhandensein 

 beider und schließliches Eingehen des einen bzw. Überwuchern des anderen Typs an. 



Für das Gelingen der ScHERESCHEWSKY'schen ^lischkulturen ist es sehr wesent- 

 lich, daß man eszidierte syphilitische Gewebs Stückchen in das halbstarre Pferdeserum- 

 Medium tief hineinbringt. Von Reizsaft allein, selbst wenn er sehr reich an Treponemen 

 ist. gelingen die Kulturen nicht. Einige Tage nach der Beimpfung trübt sich der 2sähr- 

 boden, zunächst um das eingebrachte Gewebsstückchen herum und längs des Ein- 

 führungsstiches, und nimmt einen schmutzig-grauen, mitunter grau-grünlichen Farben- 

 ton an ; gleichzeitig beginnt sehr häufig eine stetig zunehmende Verflüssigung des Xähr- 

 mediums. nach 10—14 Tagen ist nicht selten die ganze Kultur verflüssigt. Die spiro- 

 chätenreichen Röhrchen zeigen einen charakteristischen widerhchen fauhgen Gerach. 

 „Der Kenner kann schon mit ziemlicher Sicherheit durch Beriechen der Kultur- 

 röhrchen feststellen, ob sie Spirochäten enthalten" (Mühlexs). Die Weiterimpfungen 

 geschehen am besten von 8 — lOtägigen Kulturen, indem man mit einer sterilen aus- 

 gezogenen KapiUarpipette einige Tropfen verflüssigten Materials aus der Tiefe des 

 KultuiTöhrchens ansaugt und auf den Boden eines frischen ]!sährbodens bringt. Es ist 

 zweckmäßig, stets mehrere Röhrchen zu beimpfen, da nicht immer alle gleichmäßig 

 gut angehen. Die ^lischkulturen enthalten nicht selten noch nach über 2 — 3 Wochen 

 lebens- bzw. entwicklungsfähige Treponemen, wenngleich die aktive Beweglichkeit 

 inzwischen häufig vöUig aufgehört hat. 



Während Arxheim (1909) bei seinen Xachprüfungen zwar einige Male Spirochäten 

 in den Xährl)öden gefunden hatte, deren Vermehrung und Identität mit der Pallida 

 ei aber nicht für erwiesen hielt, konnte Mühlexs (1909), wie schon angedeutet, die 

 ScHERESCHEWSKY'schen Beobachtungen bald nicht nur in großer Untersuchungsreihe 

 bestätigen, sondern es gelang ihm auch aus einer seiner ersten gelungenen ]^DschkuI- 

 turen eine Reinkultur von Spirochäten, die morphologisch von der PaUida nicht zu 

 unterscheiden waren. Das Ausgangsmaterial stammte von einer Drüse eines Sekundär- 

 Syphilitischen, in der durch Punktion das Vorhandensein einer in allen morphologischen 

 Eigenschaften mit der Palhda absolut identischen Spirochäte nachgewiesen worden 

 war. Stückchen der exzidierten Drüse wurden in erstarrtes Pferdeserum gebracht. 

 In dem teilweise verflüssigten ]N^ährboden entstand dann eine ]klischkultur von Spiro- 

 chäten und Kokken, bei der die Spirochäten bei weitem überwogen. 



Offenbar war das Spirochätenwachstum durch die Kokkenanwesenheit begünstigt, 

 die vielleicht bei der Exstirpation sekundär hinzugekommen waren. (Aus im Xähiboden 

 bakterienfrei gebliebenen Drüsenstückchen wurden nie Spirochäten gezüchtet.) Bei 

 mehrmaligem Weiterzüchten gelang im Juni 1909 der Versuch der Isolierung der 

 Spirochäten (unter Benutzung der Methode der Zahnspirochätenzüchtung) in der 

 4. Generation. Die Spirochäten ließen sich dann im hohen Stich in Pferdeseramagar 

 bis auf den heutigen Tag weiterzüchten (gegenwärtig 102. Generation nach 2 14 jähriger 

 Weiterkulti\ierang). 



Das Isolierungsverfahren ist kurz folgendes: Je 2 Teile neutralen oder schwach 

 alkalischen verflüssigten, auf ca. 50° abgekühlten Agars werden mit 1 Teil inaktivierten 

 klaren Pferdeserums durch Zusammensießen vermischt. Das Pferdeseram muß vor 



