Treponema pallidum i^Schaudixs . 415 



dem Mischen einige Zeit (ca. V4 Stunde) bei 50 — 55° gehalten werden, damit möglichst 

 die Luft ausgetrieben wird: Den gemischten Senimagar kühlt man auf 45° ab. Dann 

 bringt man in ein Serumagarröhrchen mit einer langen Xadel 1 Öse der ^Mischkultur 

 und schüttelt den Platindraht gut aus; mit derselben Xadel beimpft man alsdann in der 

 bekannten Weise in fallenden Verdünnungen noch mehrere Röhrcheu und läßt sie in 

 kühlem Wasser schnell erstarren. 



In einem auf solche Weise von der schon genannten Drüsen-^Mjschkultur beimpften 

 Schütteköhrchen wurden nach 5 — 7 Tagen einige feine hauchartige wolkige Kolonien 

 ganz unten im Xährl)oden gefunden, die sich bei der Untersuchung als Treponemen ohne 

 Jede Beimengung herausstellten. Von den Kolonien gelang die Öerimpfung in Rein- 

 Stichkultur. Die Stichkultur bestand aus einer Kette von perlschnurartig mehr oder 

 minder dicht aneinander gereihten Kolonien. Das Aussehen ist gut aus den photogra- 

 phischen Abbildungen (Tafel X Figg. 1 — 3) zu erkennen. Fis:. 1 u. 3 stellen Stichkulturen 

 dar, Fig. 2 eine Schüttelkultur von isoliert hegenden Kolonien. Die wiederholten 

 Schüttelkulturen, in denen immer nur Spirochätenkolonien aufgingen, beweisen auch die 

 sichere Reinkultur. Die Einzelkolonie beginnt 4 — 7. meist am 4. — 5. Tage nach der 

 Beimpfung zu wachsen, indem in dem hellgelben ganz durchsichtigen Pferdeserumagar- 

 röhrchen zunächst ganz winzige, bei durchfallendem Lichte kaum erkennbare weiße 

 oder weißgelbhche Pünktchen erscheinen, die in den nächsten Tagen zu runden, anfangs 

 zarten, später üppigen, aber durchscheinenden wolkigen Kolonien mit einem etwas 

 dichteren Zentrum sich vergrößern. Das Wachstum geht straldenförmig gleich- 

 mäßig nach der Peripherie in den Nährboden hinein vor sich, und zwar nur in 

 den unteren zwei Dritteln des Xährbodens, also streng anaerob. Im Aussehen 

 gleichen die jüneferen Kulturen denen von Schweinerotlauf, 8 — 12 Tage alte, dichte, 

 bis ^4 C'iii große wolkige Kolonien trüben häufig den ganzen Nährboden in ihrer 

 Umgebung. Es sei nochmals besonders daraufhingewiesen, daß die jungen Kolonien 

 in den Schüttelkulturen wegen ihrer Zartheit anfangs sein* leicht übersehen werden. 

 So hatte Mühlexs auch die ersten isoherten Kolonien anfangs bei durchfallendem 

 Lichte nicht erkannt, obwohl sein Auge schon durch das Studium der ähnücheu 

 Dentium- Kulturen geübt war. Das Röhrchen war bereits als negativ weggelegt; 

 da wurde zufälüg bei einem Blick auf das Kulturröhrchen gegen den dunklen Unter- 

 grund auf dem Tische bei auffallendem Lichte die wolkige Kolonie bemerkt. 



Die Reinkulturen halten sich im Brutsclu-ank bei 37° 8 — 14 Tage lang überimpf- 

 bar. Am besten überträgt man nach 6 — 8 Tagen die Passagen weiter. Dabei geheji 

 aber lange nicht immer alle Kulturen an. Deshalb beimpft man zweckmäßig stets eine 

 ganze Anzahl von Serumagarröhrchen. L'm an das Material für die Weiterimpfung zu 

 gelangen, muß man die unteren Enden der Reagenzgläser nach vorherigem Ritzen 

 mit einem Schreibdiamanten vorsichtig abschlagen. Dann läßt man die Agarsäule, 

 behutsam Verunreinigungen vermeidend, in eine sterile Petrischale hineingleiten, 

 ^lit einem sterUen Messer wird sie dem Stichkanal entlang aufgeschnitten, so daß die 

 durchschnittenen Spirochäteukolonien frei zu hegen kommen. Die Überimpfungen 

 werden dann mit einer langen nicht zu dicken Platinnadel in die fertigen, vorher 2 Tage 

 lang bei 37° auf Sterihtät kontro Uferten Semmagarnährböden hinein in hohem Stich 

 vorgenommen. Pferdeserumagarröhrchen, die vor der Impfung einige Tage im Brut- 

 schrank gestanden haben, eignen sich viel besser für die Weiterzüchtung als frisch 

 bereitete Xährbödeu, die mau unmittelbar beimpft. 



Auffallend ist, daß es Mühlexs selbst nur einmal bei tausenden von Isoherver- 

 suchen gelang, eine Reinkultur aus den auch ihm ziemhch häufig glückenden Misch- 

 kulturen in halbstarrem Pferdeserum herauszuzüchten, obwohl ei sehr häufig solch 

 letztere mit sehr zahlreichen Sph-ochäten vom Palhda- und auch vom Refringenstyp 

 erhielt, ^leln Glück hatte W. H. Hoffmaxx. der im Berliner Institut für Infektions- 



