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krankheiten die Kultur versuche fortsetzte. Er berichtete im Jahre 1910, daß ihm 

 mehrere Isolierungen gelangeu, auch aus syphilitischem Schanker vom Kanincheu- 

 hoden. Zunächst reicherte er auch stets auf dem ScHERESCHEWsKY'schen l^ähr- 

 boden an. Dann machte er die Isolieriingsversuche auf dem MÜHLENs'schen Pferde- 

 serumagar. Dabei bewährte sich folgendes Verfahren: Macht man von einer Misch- 

 kultur einen Stich in fertigen Serumagar, dann zeigt sich nach 6 — 8 Tagen außer 

 reichlichem Begleit-Bakterienwachstum häufig rund um dieses herum eine nach der 

 Peripherie hin sich ausdehnende zarte Trübung. Vom Rande dieser Wolken 

 (= Treponemenwachstum) konnte Hoffmann die Treponemen leichter isolieren als 

 mittels Schüttelkultur. Nach einer privaten Mitteilung (Oktober 1911) gelangen ihm 

 (Hoffmann) im ganzen 10 sichere Reinkulturen, zum Teil in mehreren Stämmen 

 auf dem Serumagarnährboden, teils von Menschen-, teils von Kaninchensyphilis, 

 allerdings bei im Laufe von 2 Jahren in mühseliger Arbeit vorgenommenen ,, vielen 

 Tausenden" Kultur- und Isolierungsversuchen. ^) Damit ist sicher bestätigt, daß die 

 Reinkultur von Treponemen des Pallidatyps auf dem Pferdeserumagar nach vor- 

 heriger Anreicherung in halbstarrem Pferdeserum gelingt. 



MÜHLENS und W. H. Hoffmann haben ihre Resultate ausfühilich veröffentlicht 

 (Klin. Jahrbuch 1910 Bd. 23 bzw. Zeitschr. f. Hyg. und Inf.-Krankh. 1910 Bd. 58). 

 Die genaueren Details sind daselbst nachzulesen. Hier mögen einige weitere zusammen- 

 fassende Angaben genügen, zunächst noch einige Charakteristika der Kulturen: 

 Die aufgeschnittenen Kulturen zeichnen sich durch einen intensiven Geruch aus, der 

 wahrscheinlich durch eine Zersetzung des Serums zustande kommt. Hoffmann ver- 

 mißte diesen Geruch bei Passage-Kulturen in reinem Agar ohne Serumzusatz, die 

 ihm auch mitunter gelangen. Auf die Dauer ließen sich jedoch die Treponemenstämme 

 in reinem Agar nicht halten, so daß Hoffmann nach Ausprobung der verschiedensten 

 Modifikationen zu dem Resultat kam: ,,Der Serumagar nach Mühlens hat sich 

 auch mir immer wieder als der brauchbarste Nährboden bewiesen, auf dem die Spiro- 

 chäten sich mit ziemlicher Sicherheit weiterzüchten ließen." In neuerer Zeit sah 

 Mühlens (noch nicht veröffentlicht) ein bedeutend besseres, schnelleres und ü])pigeres 

 Wachstum der Reinkulturen, wenn er statt 2 Teilen x\gar mit 1 Teil Serum gleiche 

 Mengen Agar und Serum mischte oder gar 2 Teile Serum mit 1 Teil Agar. Vielleicht 

 läßt sich auf diesa Weise auch eine bessere Isolierung erreichen. In halbstarrem Serum 

 nach Schereschewsky wachsen die Reinkulturen rieht weiter. Auch auf Platten 

 unter anaerobem Abschluß sah Mühlens nie Wachstum, Hoffmann einmal eine 

 Kolonie. 



Statt Pferdeserum kann auch inaktiviertes Kaninchen-, Affen- oder Menschen- 

 serum sowie Ascites als Nährbodenzusatz benutzt werden. In reiner Gelatine wurde 

 bisher kein Wachstum erzielt. In flüssigen Nährböden: Bouillon, Seruml)ouillon, 

 Ascitesbouillon, gelang die Kultur selbst unter strenger Anaerobiose (nach Lentz 

 und anderen Verfahren) zunächst nicht. Dagegen erzielte Mühlens eine Passage- Kultur, 

 wenn er in Serumbouillon Klümpchen von zerstückeltem, erstarrtem Pferdeserum 

 steril auf den Boden brachte und unter Sauerstoffabschluß züchtete. Ferner gelang zu- 

 fälhg die Kultivierung in einem Senimbouillonröhrchen, in das als accidentelle Ver- 

 unreinigung ein an der Oberfläche als dichte Haut wachsender streng aerober Sapro- 

 phyt hineingelangt war. Mit diesem ,,Zusatzbakterium" (Mühlens), dessen Eigen- 

 schaften von Hoffmann genauer beschrieben sind, konnten die Treponemen ohne jeden 

 Sauerstoffabschluß bis heute in über 80 Generationen in Serumbouillon (1 : 2) weiter ge- 



^) Auch Shmamine (Breslau) komite — außer der Dentium — auch anscheinend eine 

 Reinkultur vom Pallidatyp erhalten (Private Mitteilune;). Er weist auch auf die enormen 

 Schwierigkeiten der Isolierung hin. S. auch Centralbl. f. Bakt. Orig. 1911. Bd. 61. 



