Synthèse Enzymatique des Ribopolynucléotides 345 



considérable sera ainsi réalisé. Néanmoins il est probable que ce sont des en- 

 zymes protéiques qui synthétisent l'acide nucléique, la protéine pouvant même 

 participer non enzymatiquement à cette synthèse, comme on le verra dans cet 

 exposé. Il est donc difficile de séparer les deux synthèses: acides nucléiques et 

 protéines, l'une de l'autre. On peut certes dans certaines conditions (variation 

 du pH, de la concentration en sels du milieu, mélange de certains polymères 

 [7-9]) obtenir une polymérisation spontanée de ribopolynucléotides, mais celle-ci 

 se fait toujours à partir d'imités de polymère déjà existantes. Aussi est-il difficile 

 de décider laquelle des deux synthèses: protéines ou acides nucléiques a 

 précédé l'autre au cours de l'évolution. 



Nos connaissances sur le mécanisme de synthèse des chaînes polynucléoti- 

 diques des acides ribo- et désoxyribonucléiques restaient très obscures jusqu'à 

 ces dernières années. Une des raisons en était que la plupart des données pro- 

 venaient d'expériences effectuées in vivo. Tout dernièrement deux enzymes ont 

 été isolés des bactéries, l'un par Ochoa et moi-même [10] catalysant la syn- 

 thèse des ribopolynucléotides à partir des nucleosides 5'-diphosphates, et l'autre 

 par Romberg [11] et ses collaborateurs catalysant la synthèse des désoxypoly- 

 nucléotides à partir des desoxy- 5 '-triphosphates. Je me limiterai dans cet ex- 

 posé à ime mise au point du mécanisme de synthèse des ribopolynucléotides, 

 m' étendant surtout sur nos résultats récents. Ceux-ci font ressortir l'importance 

 de la configuration des ribopolynucléotides pour leur rôle biologique et con- 

 cernent l'isolement à partir de la levure d'un nouveau système enzymatique 

 catalysant une synthèse de polynucleotides, mais différent de l'enzyme bactérien. 



L'enzyme bactérien isolé pour la première fois à partir d'Azotobacter vine- 

 landii [10] catalyse la synthèse des polynucleotides à partir des nucleosides 5'- 

 diphosphates avec une Hbération de phosphore. La réaction est reversible et il 

 se produit un cUvage phosphorolytique des ribopolynucléotides avec formation 

 de nucleosides 5 '-diphosphates. La réaction est donc analogue à la synthèse 

 réversible des polysaccharides par la 'Phosphorylase'; pour cette raison le 

 nouvel enzyme a été appelé 'polynucleotide Phosphorylase'. Il catalyse cette 

 réaction : 



«(XRP-P) ^ (XRP)„ + «Pm 



où R représente le ribose, P-P le pyrophosphate, Pm l'orthophosphate et X ime 

 ou plusieurs des bases suivantes: adenine, hypoxanthine, guanine, uracile ou 

 cytosine. La Table i montre la stoechiométrie de la réaction en présence d'IDP, 

 dans les deux directions. Dans l'expérience i, la polynucleotide Phosphorylase 

 purifiée est incubée avec l'IDP, les quantités de P hbéré, de polynucleotide 

 formé et d'IDP disparu déterminé comme P Hbéré par un enzyme spécifique 

 IDPase [12] sont environ les mêmes. Dans l'expérience 2 une partie aliquote 

 du surnageant après destruction de l'IDP est incubée de nouveau avec la poly- 

 nucleotide Phosphorylase. Les quantités de P, de polynucleotides disparus et 

 d'IDP formés sont stoechiom étriqués. Dans l'expérience 3 une solution dialysée 

 du polymère I est incubée avec la polynucleotide Phosphorylase en présence de 

 Pm. Ici encore les quantités de polynucleotides, de Pm disparu et d'IDP formé 

 sont équivalentes. La réaction requiert le Mg. 



