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MARIANNE GRUNBERG-MANAGO 



Table i 



Stoechiometrie et réversibilité de la reaction catalysée par la 

 polynucleotide Phosphorylase 



I. Réaction de synthèse. 2. Réaction de Phosphorolyse après élimination de l'excès 

 d'IDP en I. 3. Réaction de Phosphorolyse avec vm polynucleotide isolé. 



La polynucleotide Phosphorylase, en présence de Mg, incorpore le phosphate 

 radioactif dans le groupement terminal des nucleosides 5 '-diphosphates ce qui 

 est dû au moins en partie à la réversibilité de la réaction. Le polynucleotide 

 composé uniquement d'unités de nucleoside 5 '-monophosphate n'est donc 

 jamais marqué en présence de phosphate radioactif. 



L'incorporation de phosphate ou l'échange a été utilisé comme test pour 

 l'isolement et la purification de l'enzyme. 



Des préparations environ 75% pures en en2yme ont pu être obtenues tout 

 récemment au laboratoire de Dr Ochoa [13]. 



Des polymères simples contenant l'AMP, l'IMP, le CMP ou l'UMP comme 

 seule unité de base ont été préparés en incubant l'enzyme avec les nucleosides 

 diphosphates correspondants [10]. On les désignera respectivement par polyA, 

 I, C, U. Si on évite la chaleur et l'acidité au cours de l'isolement des polymères, 

 leur poids moléculaire moyen peut être élevé. Les valeurs de 570 000 et 800 000 

 ont été obtenues respectivement pour les polymères A et I par la méthode de 

 diffusion de la lumière. 



Des polymères mixtes, c'est à dire des polymères contenant deux ou plusieurs 

 unités de bases différentes, ont été préparés en incubant des mélanges de nucleo- 

 sides diphosphates avec la polynucleotide Phosphorylase. Plusieurs de ces 

 polymères ont été préparés à partir de mélanges d'adénosine et d'uridine di- 

 phosphates en proportions variées: polymères A-U [14]. Je reviendrai sur ce 

 point au cours de mon exposé. A partir d'un mélange de nucleosides 5 '-diphos- 

 phates d'adénosine, guanosine, uridine et cytidine l'enzyme catalyse la synthèse 

 de polynucleotides contenant les 4 nucleotides présents dans l'acide ribonu- 

 cléique naturel [10]. Deux polymères A-G-U-C ont été ainsi obtenus, l'un en 



