Synthèse Enzymatique des Ribopolynucléotides 



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Table 2 



Influence de la concentration des nucleosides diphosphates sur la composition des 

 polynucleotides biosynthétises à partir de ces nucleosides 



Les polynucleotides étaient préparés suivant la technique habituelle [lo]. 

 Le mélange d'incubation contient par ml.: loo /^moles TRIS pH 8,1, lo 

 /<moles MgCl25 I58 unités de polynucleotide Phosphorylase d'A.S = 14,8. 

 Incubation de 23 à 36 h à 30°. 



A la fin de l'incubation le liquide est refroidi à 0° et précipité par 2 vol. 

 d'éthanol (à 96"") à froid. Le mélange est laissé i h. à 0° et centrifugé 10 

 minutes à 1 5 000 g. Le précipité est dissout dans l'eau distillée et précipité 

 par l'éthanol comme la première fois. Ce dernier précipité dissout dans l'eau 

 est dialyse 48 h avec agitation contre l'eau distilllée à + 4° environ. La com- 

 position en nucleotides des polymères est déterminée de la manière suivante : 

 le polynucleotide est hydrolyse 48 h à 37° dans la potasse 0,04 N, puis Chro- 

 matographie suivant la technique de Krebs & Hems [26]. Les taches nucléo- 

 tidiques sont éluées avec 5 ml. 0,01 N-HCl 48 h à la température de la pièce 

 et les blancs (papier seul) défalqués. 



La correction a été faite pour les impuretés présentes dans les échantillons de nucleo- 

 tides diphosphates utilisés. L'ADP contenait 2% d'ATP et d'AMP, l'UDP contenait 

 5% d'UMP. 



Le polymère A-G-U-C préparé par Smellie & Ochoa [27] à partir d'un 

 mélange contenant les 4 diphosphates en proportion équimoléculaire, a une 

 composition similaire à celle de l'acide ribonucléique à' Azotobacter vinelandii. 



Il faut remarquer qu'ici aussi, alors que le polymère a été préparé à partir 

 d'un mélange équimoléculaire de nucleosides diphosphates, la proportion des 

 nucleotides dans le polymère biosynthétique n'est pas exactement équimolé- 

 culaire, mais proche de celle de l'acide ribonucléique à^ Azotobacter et des 

 bactéries en général. En effet, la composition en nucleotides des acides ribo- 

 nucléiques ne varie pas d'vme manière significative d'une espèce bactérienne 

 à l'autre, comme c'est le cas de l'acide désoxyribonucléique (Belozersky) [28]. 

 On doit donc supposer que dans la plupart des bactéries les nucleosides di- 



