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D' MAURICE NICLOUX — LA SAPONIFICATION DES CORPS GRAS 



Une fois arrivé à la solution, j'ai pu, par quelques 

 expériences très faciles à imaginer, réaliser in 

 vitro un des phénomènes les plus importants de hi, 

 vie cellulaire, pendant la germination de la graine 

 oléagineuse, et loucher ainsi un point important de 

 la Physiologie végétale. Mes travaux entrepris dans 

 cette voie ont été repris et complétés très fructueu- 

 sement par E. Urbain. J'aurai, d'ailleurs, l'occasion 

 de revenir sur les trdvau.\ très intéressants de cet 

 auteur et je vais aborder maintenant, immédiate- 

 ment, la question de l'isolement de la substance 

 active. 



II. — Tentatives d'kxtraction 



DK LA SUBSTANCE ACTIVE DK L \ liRAlNE ME RICIN. 



§ 1. — Constitution de la graine. 



Je rappelle tout d'abord l'expérience suivante, 

 qui est capitale. On prend de la graine de ricin 

 dont on a constaté le haut pouvoir saponifiant en 

 suivant la technique décrite par Connstein, Hoyer 

 et 'Wartenberg, et on l'épuisé parl'éther de pétrole 

 ou l'éther, pour en retirer l'huile; on obtient ainsi 

 un tourteau qui, remis en suspension dans l'huile, 

 possède toutes les propriétés lipolytiques de la 

 graine primitive. Or, si l'on prend ce tourteau, et 

 qu'on l'épuisé par l'eau, l'eau salée ou autres 

 réactifs, on constate qu'à la fois ce qui reste sur le 

 filtre et ce qui filtre est inactif. Dès lors, on 

 comprend immédiatement le peu d'intérêt qu'il y a 

 à suivre la voie, pourtant jusque-là si féconde, 

 d'extraction des diastases. 



11 y avait donc, dès l'origine, l'indication de 

 rechercher la solution du problème dans une tout 

 autre direction. 



Examinons donc quelle est la constitution de la 

 graine de ricin. 



L'examen microscopique a indiqué, depuis bien 

 longtemps déjà, que la graine de ricin est formée de 

 très grandes cellules, à noyaux très petits, gorgées 

 de grains particuliers nommés grains d'aleurone; 

 ceux-ci sont eux-mêmes constitués par une subs- 

 tance albuminoïde : ils servent de réserve au 

 moment de la germination, tout comme les grains 

 d'amidon dans les céréales; l'étude chimique en a 

 été fort bien faite par Maillot, que nous avons déjà 

 eu l'occasion de citer. 



Voici quelques caractères microscopiques de ces 

 grains d'aleurone. Il suffit, pour avoir les rensei- 

 gnements les plus détaillés, de se reporter aux 

 traités de Botanique. Ils sont, en général, de forme 

 allongée, présentant à une extrémité une partie 

 arrondie très nettement visible, faisant saillie quel- 

 quefois sur la partie périphérique du grain ; on 

 désigne cette partie, à cause de son aspect même, 

 sous le nom de globoïde; l'autre partie du grain est 



appelée cristalloïde, à cause aussi d'une propriété 

 particulière : celle de prendre un aspect cristallin 

 lorsque l'on traite les grains d'aleurone par l'eau. 

 La dimension des grains d'aleurone est variable, 

 mais le plus grand nombre, dans le ricin, ont une 

 dimension qui oscille autour d'un diamètre de 8 [a, 

 par conséquent un peu supérieur à celui des glo- 

 bules sanguins. 



Pour terminer cette courle description de la 

 constitution de la graine, il nous faut dire, en se j 

 rapportant aux travaux des botanistes, que noyauxj 

 et grains d'aleurone se trouvent au milieu d'un' 

 protoplasma ou, plus exactement, d'un cytoplasma, 

 dont les granulations sont si fines qu'elles sontj 

 quasi inappréciables aux plus forts grossissements. 



Voilà quels sont les éléments cellulaires. Voyons 

 si une tentative de séparation de ces éléments ne 

 nous conduirait pas à une extraction de la subs- 

 tance active. 



On sait quels services rend dans les labora- 

 toires l'emploi journalier des appareils à centri- 

 fugation : ils permettent la séparation relativement 

 rapide et toujours très nette de subslances ou 

 d'éléments dont les poids spécifiques sont extrême- 

 ment voisins; dans le domaine de la Physiologie, 

 ils permettent, par exemple, de séparer très aisé- 

 ment les globules blancs des globules rouges, ce 

 qui, par tout autre moyen, serait, sinon impos- 

 sible, du moins très long et très difficile. 



Ces considérations m'ont incité à me servir de 

 la centrifugalion pour réaliser une séparation des 

 éléments cellulaires de la graine de ricin, et, après 

 quelques tâtonnements, j'y suis parvenu à peu près 

 complètement. Voici comment il convient d'opérer : 



La graine de ricin, de préférence décortiquée, 

 est broyée; on ajoute à la masse de l'huile de ricin 

 ou mieux de l'huile de coton plus fluide, ce qui 

 facilite les manipulations. Le mélange, rendu bien 

 homogène, est filtré d'abord sur un tissu à mailles 

 lâches, puis sur une toile fine. 



A cette première oiiération, correspond déjà une 

 séparation grossière; sur le tissu se trouvent, en 

 effet, réunis la plus grande partie des téguments, 

 des parois cellulaires, des grains d'aleurone et une 

 certaine quantité de cytoplasma avec des noyaux. 



L'huile filtrée qui s'écoule est trouble; elle 

 contient en suspension un mélange de grains 

 d'aleurone et de cytoplasma, avec quelques fins 

 débris de membranes cellulaires. 



Reste à séparer ces composants de la cellule. 

 Voici une méthode qui permet d'atteindre ce but; 



On centrifui,'p l'huile, additionnée ou non d'un dis-- 

 solvant, au moyeu d'un appaieil de grande puissance, 

 et l'on obtient dans les tubes du oeutrifuijear, apnjs un 

 certain temps variable avec la lluidité du mélange et 

 la vitesse de l'appareil, deux couches bien distinctes. 

 L'examen microscopique de celles-ci permet de faire 



