D'- MAURICE NICLOUX - L.\ SAPONIFICATION DES CORPS GRAS 



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les oonstatations suivantes : la couche inférieure blan- 

 châtre est conslitui'e par les grains d'aleuriine ac<om- 

 pagups par queli|ucs débris de membranes cellulaires; 

 la couche supérieure grisâtre n"rn renferme plus ou à 

 peu près, la vitesse de l'appareil et la dilférence de 

 densité ayant eu pour effet de réunir au fond du tube 

 les grains d'aleurone petits ou gros. Cette couche supé- 

 rieure est alors presque uniquement constituée par le 

 cytoplasnia, un certain nombre des noyaux, fort petits 

 dans le cas actuel ', et quelques-uns des grains d'aleu- 

 rone ayant pu échapper à la liltration et à la ccntrifu- 

 galion. 



On peut débarrasser le cytoplasnia ainsi préparé 

 de l'huile qu'il contient encore en forte proportion en 

 ayant recours à un solvant; en centrifugeant ci nouveau, 

 on l'obtient alors à l'état sec. 



Ainsi se trouvent réalisées par un procodé très 

 simple, purement mécanique, qui n'altère nulle- 

 ment les substances mises en expérience : 1° la 

 séparation des grains d'aleurone pratiquement 

 exempts de cytoplasma; 2° la séparation des 

 substances cytoplasmlques'. 



§ 2. — Le cytoplasma constitue la partie active 

 do la graine et, à l'exclusion de tous les autres 

 éléments cellulaires, est doué du pouvoir lipo- 

 lytique. 



La séparation que nous venons d'effectuer va 

 nous permettre maintenant d'aborder, par une mé- 

 thode différente, le problème que nous nous étions 

 posé, à savoir : la séparation de la partie active 

 de la graine? Nous avons vu que la lenlalive d'ex- 

 traction d'une diastase, par les procédés ordinai- 

 rement mis en œuvre, avait abouti à un résultat 

 négatif; or, l'étude de l'action lipolytique des diffé- 

 rents éléments cellulaires, séparés comme il vient 

 d'être dit, va justement nous fournir la solution du 

 problème. 



Tout d'abord, pour étudier méthodiquement cette 

 action lipolytique, il est nécessaire d'établir un 

 tprocédé de mesure qui permette de l'apprécier. J'y 

 suis arrivé par la méthode suivante, dont je vais 

 résumer très brièvement la technique : On prend 

 O gr. 1 de la substance dont on veut déterminer ce 

 que j'appelle Vaclivité; on ajoute gr. 9 d'huile 

 de colon " et ce. 4 d'acide acétique N/IO 

 6 °/„„) ; le tout étant pesé dans un verre de montre, 

 on agite avec un tout petit agitateur de verre re- 

 courbé à angle obtus, une minute à l'origine, puis 

 une minute après 10 minutes, puis une autre mi- 

 >nute après 20 minutes ; après 30 minutes, on dissout 



I' La grosseur des noyaux, uniques dans chaque cellule, 

 -est bien inférieure à celle de la plupart des grains d'aleurone, 

 iet si petile par rapport aux dimensions de la cellule qu'il 

 n'y a, pour ainsi dire, pas lieu d'en tenir cunipte dans le 

 cas actuel. 



' Qu'il me soit permis d'adresser ici l'assurance de ma 

 vive reconnaissance à M. le Professeur Guignard, Membre 

 de l'Institut, pour les conseils éclairés qu'il n'a cessé de 

 .me prodiguer au cours de cette partie de mon travail. 

 ' îliiile de coton comestible, neutre. 



BEVUE GÉ.NÉRALE DES SCIE.NCES, 19G5. 



le mélange dans l'élher-alcool à parties égales et on 

 titre l'acidité avec une solution de soude N/o; la 

 phénol-phtaléine sert d'indicateur. 



Le nombre de centimètres cubes de soude qui 

 sature l'acide gras mis en liberté représente Vacli- 

 vité a/)p«i'ew/e, par opposition à Vaclivité réelle qui 

 se déduit de la première au moyen d'une courbe 

 obtenue comme suit : 



On dilue dans de l'huile de coton des poids 

 déterminés d'une substance d'activité initiale appa- 

 rente représentée par 10 et l'on en mesure la nouvelle 

 activité par titration; il n'y a pas proporlionnalilé, 

 et Ion obtient ainsi, une courbe qui relie l'activité 

 réelle, représentée par le poids de la substance 

 d'activité initiale 10, et l'activité apparente fournie 

 par la titration '. 



Mais revenons à la graine. L'activité réelle de la 

 graine ayant été mesurée comme il vient d'être 

 dit, on mesure ensuite l'activité réelle des deux 

 éléments cellulaires séparés : grains d'aleurone et 

 cytoplasma, et l'on s'aperçoit alors que toute l'acli- 

 vité primitive de la graine se trouve être exclusive- 

 ment concentrée dans le cytoplasma; de sorte que 

 l'on arrive, en parlant d'une graine d'une "certaine 

 activité, à séparer les grains d'aleurone purs, mais 

 d'activité nulle, et le cytoplasma-, pur, exempt de 

 grains d'aleurone et d'une activité considérable, 

 étant donnée sa faible proportion relative dans la 



' Prenons un exemple : 



Soit un mélange huileux de cytoplasma et d'huile d'acti- 

 vité 10. Cela veut dire qu'un mélange de gi: 1 de cette 

 substance + gr. 9 d'huile -f- c.c. 4 d'acide acétique X/10 

 donne, après une demi-heure, une acidité correspondant à 

 tO c.c. de soude N/li. 



Prenons gr. 05 de cette substance -f- gr. 95 d'huile 

 -|-Oc.c. 4 d'acide acétique N/10; nous devrions obtenir 

 après une demi-heure une aciilité correspondant à 5 c.c. de 

 soude N/o; or, il n'en est rien, et nous trouvons un chiltre 

 plus élevé (5 c.c. 5 environ) : ce chiffre représente l'activité 

 apparente, alors que l'activité réelle, est 5. 



j'ajouterai ceci : on pourrait prendre comme unité d'acti- 

 vité l'activité 10; cette activité pourrait être appelée activité 

 normale et serait représentée par t. Une substance d'activité 

 réelle égale à 5 aurait alors une activité normale représentée 

 par 1 /2 ; une substance d'activité réelle égale à 2.5 aurait une 

 activité normale représentée par 1/4 et, en général, une 

 substance d'activité réelle égale à n aurait une activité 

 1 



normale représentée par 



10: n 



On comprend aisément que. 



si l'on veut eHéctuer la saponification d'une huile déterminée, 

 s'il faut 1 partie de cytoplasma d'activité aortnalel, il faudra : 

 2 parties de cytoplasma d'activité normale 1/2, i parties de 

 cytoplasma d'activité normale 1/4, etc., le dénominateur 

 indiquant immédiatement la quantité à employer, ce qui, 

 au point de vue pratiiiue, présente un certain intérêt. 



- Le cytoplasma vient d'être préparé tout récemment en 

 Allemagne sous le nom de Ricinussamen Extracl, par un pro- 

 cédé qui relève de celui que je viens d'exposer plus haut; il 

 consiste à broyer la graine non en présence de l'huile, mais 

 en présence de l'eau ; les grains d'aleurone sont séparés, 

 comme dans ma méthode, p.arcentrifugation: le cytoplasma 

 protégé par l'huile ou l'acide gras ne subit pas l'action 

 nocive de l'eau, comme le montrent mes expériences à ce 

 sujet (voir plus bas, p. 1033). 



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