Queste varie miscele coloranti, le ho saggiate sui Blastoiniceti vivi 

 o morti, mai però fìssati sui vetrini coproggetti o portoggetti coll'essicca- 

 mento all'aria e col calore, perchè facendo tali trattamenti a scopo mi- 

 crochimico, doveva cercare di evitare tutte le possibili cause di errore (*). 



A parte intanto questo , mi consta che per ottenere la colorazione 

 della membrana nei preparati non essiccati , i più utili sono il Bleu di 

 metilene all' Erlich e l'Anilina di Hanstein fatti agire a lungo. Si può 

 anche facilitare la colorazione trattando in precedenza i Blastomiceti 

 con un acido discretamente concentrato, quale è l'Acido acetico al 2 - 

 e l'Acido cloridrico sino al 6 7o- È utile in questi casi lasciare agire 

 molto l'acido e poi dopo la disacidificazione trattare a caldo con la mi- 

 scela colorante. Perciò usai collocare il materiale blastomicetico entro 

 provette cui aggiungeva l'acido lasciandolo agire per 12-48-60 ore. Po- 

 scia toglieva r acido decantando e ripetutamente aggiungevo acqua di- 

 stillata e decantavo per varii giorni sino a che la carta bleu di torna- 

 sole non si arrossiva più. Aggiungevo allora la sostanza colorante e ri- 

 scaldavo sino all' ebollizione per 30-50 secondi. Poi lasciavo riposare e 

 osservavo. Se qualche forma era rimasta incolore, lasciavo agire il co- 

 lore ancora freddo e così a poco a poco finiva anch' essa col colorarsi. 



In t:ìle guisa, specialmente col Bleu di metilene all'Erlich e coll'A- 

 nilina di Hanstein ottenni una intensa colorazione della membrana in 

 tutti i fermenti : l'ottenni spesse volte con la Safifanina carbolica e an- 

 che con la Fuxina carbolica , nonché col Verde lodo e la Fuxina alla 

 Strassburger nello strato periferico della cellula blastomicetica. In quanto 

 alle altre soluzioni aniliniche che ho usate, impartivano alla membrana 

 un grado di colorazione appena apprezzabile. Aggiungerò quindi solo 

 che col Verde-metil-acetico aggiunto in quantità di Ice. a 25cc. di liquido 

 culturale, potei colorare in vita la membrana dei Blastomiceti, sebbene 

 sempre molto pallidamente. 



3. Trattamento della meuibraiia con varii reagenti.— I reattivi da 

 me usati sulla membrana dei Blastomiceti sono stati: acidi, alcali, mi- 

 scele digestive, mordenti etc. 



a) Acidi.— Degli Acidi quello che meglio e più rapidamente scio- 

 glie la membrana e l'Acido cromico concentrato. La sua azione s'inde- 



(^3 Debbo però dire, a oiior del vero, che dopo l'ordinario mezzo di fissazione alla 

 fiamma, si ottiene spesso per es. con la Saffranina carbolica, o meglio con la Fuxina 

 carbolica la colorazione della membrana, con discreta facilità. 



