161 



će tomu pomoći pokusi izvedeni s nekoliko još neistraženih 

 vrsta istom metodom, koja je upotrebljena kod istraživanja 

 cijanoficeja. 



Metodika. 



Kako je spomenuto, postoji već način, kojim se možemo 

 uvjeriti o prisutnosti hitina u membrani. To je poznata mikro- 

 kemijska metoda od van Wisselingha. Ta se metoda sa- 

 stoji u tom, da se objekt, koji se nalazi u zataljenoj cijevi do 

 polovine ispunjenoj koncentrovanom kalijevom lužinom i smje- 

 štenoj u tuljku od mrežice, zagrije u uljenoj kupelji do 160^ C. 

 Hitin se pretvara kod ove visoke temperature u kalijevoj lužini 

 u hitozan (mikozin), koji se jodom bojadiše Ijubičasto-crveno. 

 Stoga se preparat ponajprije ispere u 907o alkoholu, a onda u 

 destilovanoj vodi. Tad se istražuje pod mikroskopom. Ako pre- 

 parat, dotično membrane sadržavaju hitin, poprimiti će razre- 

 đenim jodjodkalijem (V5 7o) i razredenom sumpornom kiselinom 

 (1%) jasnu crveno-ljubičastu boju. 



Kod te je metode već dosta neprilično ono zataljivanje 

 cijevi; osim toga često se dogodi, da cijevi puknu, a k tomu 

 i sama priprava zahtijeva odviše vremena. 



Van Wisselingh^ primjećuje u spomenutoj raspravi,^ da 

 se hitin i kod obične temperature u razređenoj kalijevoj lužini 

 pretvara u hitozan. Budući da takvo pretvaranje biva vrlo 

 polagano, što pokuse oteščava, mora se svakako upotrijebiti 

 ugrijavanje. To ugrijavanje može se i drukčije izvesti. Dostatno je, 

 kako se je dr. V. Vouk^ u jednom pokusu osvjedočio, nešto 

 dulje kuhanje objekata u otvorenoj posudi kod temperature od 

 1 10*^0. Na taj je način reakcija mnogo olakšana. Kušala sam 

 stoga prije svega opredijeliti vrijeme, koje je nužno, da se hitin 

 kod spomenute temperature pretvori u hitozan. 



Kod pokusa sam dakako najprije upotrijebila gljive, jer je 

 kod njih hitin nesumnjivo dokazan. Objekte sam kuhala u za- 



1 V. Wisselingh, C. Mikrochemische Untersuchungen über die 

 Zellwände der Fungi. Jahrbuch für wiss. Bot. 31. 1898. p. 638. 



2 p. 638. 



* V. Vouk: Zur Kenntniss der Chitinreaktion. Berichte d. deutsch, 

 bot. Gesellschaft 1915. 



Glasnik hrv. prirodoslovnog društva. U 



