x 
304 
tako dobivenih kolonija prenositi nam je malene mnozine na nova 
hraniva tla, da dobijemo napokon čiste kulture tih vrsta. Cio 
postupak ocrtati ćemo onako, kako smo radili pri našim iztrazi- 
vanjima. 
Odkako je R. Koch upozorio na važnost prozirnoga hra- 
nivoga tla za odgajanje mikroorganizama, te osobito svratio po- 
zornost na hranivu želatinu, od onda se ova — koliko se može 
— obćenito upotrebljuje, pak smo je i mi u prvom redu rabili, 
izvodeći sa svakom iztražnom vodom najprije t. z. kulture na 
ploči (Koch). 
Hranivu Zelatinu imadjasmo što gotovu, što si ju priprav- 
ljasmo polag naputka Löffler-ova tako, da je sadržavala 10% 
čiste želatine, 1% peptonum sice. depur., 0'3—0'6% kuhinjske 
soli na litar buljona, dobivena izluženjem čista mesa (’/, klgr. na 
l. vode). Na vatri otopljenu i 1—2% otopinom natrijeva karbo- 
nata do alkalične reakcije razriedjenu smjesu valja filtrovati na 
filtru, koji treba grijati toplom vodom, jer bi smjesa inače otvrd- 
nula. Podpuno prozirni filtrat — koji se baš rabi kao hranivo 
tlo — sabirasmo u sterilizovane epruvete, u kojima pri običnoj 
temperaturi otvrdne u liepu, prozirnu masu. Sterilizovan ju pa- 
mučni čep brani od onečišćenja zamelcima, koji su u zreku. U 
epruveti ne treba da bude više od 10 cem. želatine. Nu budući 
da je sigurno, da u tako pripravljenom hranilu ima živih zame- 
taka, koji su budi s buljonom, želatinom i t. d. u njega doprli, 
budi mu se za fillrovanja primiešali, što se uz najveću pomnju 
gotovo ne može zapriečiti, to je jasno, da ovo hranilo još ne 
može valjati za naše svrhe. 
Zametke, koji su u hranilu, valja nam uništiti, dakle hra- 
nivu Zelatinu sterilizovati. To ćemo opet polučiti vrućinom, ali 
ovaj put ne suhom, nego vlažnom. U tu svrhu upotrebljujemo 
Koch-ov aparat za sterilizovanje strujećim vodenim parama od 
100% CG. Kad bismo naše hranilo takvim parama izvrgnuli u apa- 
ratu na jednu uru, mogli bi biti sigurni, da smo uništili i po- 
sljednji zametak. Ali se je pokazalo, da vlažna vrućina od 100° 
C. nepovoljno djeluje na hranilo, ako joj je ovo izvrgnuto tako 
dugo. Zato se danas u tu svrhu upotrebljuje diskontinuovana, 
prekidana, sterilizacija, da naime hranilo izvrgavamo parama te- 
čajem više dana, ali svaki put samo na 10—15 časaka. Isti se 
tiem efekat polučuje, a hranilo u sastavu svojem ni malo ne trpi. 
