Cytologische Analysis der Entwicklungsvorgänge. II. 137 
verwendet. Obwohl mit dem Annelidensperma einige Male die Be- 
samung zustande kam und dann die Eier zur Teilung schritten, so 
konnte von dieser Bastardkombination doch keine zur cytologischen 
Untersuchung hinreichende Menge erhalten werden. Mit Patella 
hatte ich bessere Erfolge, und von den aus der Kombination Asterias-® 
> Patella-3 hervorgegangenen Bastarden wird S. 203 die Rede sein. 
Als vergiftete Spermatozoen von Asterias sind hier solche 
bezeichnet, die nach Absolvierung der gleich zu nennenden Prozedur 
zur Besamung verwandt wurden und ein bestimmtes Verhalten der 
Keime zur Folge hatten. Die Vergiftung der Spermatozoen geschah 
dadurch, daß sie nach der Entnahme aus den Hoden 40—50 Minuten 
in dünne Lösungen von Methylenblau, Methylgrün, Neutralrot oder 
Bismarckbraun gebracht wurden. Sie verblieben solange in den 
Farblösungen, bis ihre lebhaften Bewegungen nachzulassen begannen. 
Das geschah bei einem für die verschiedenen Lösungen verschiedenen 
Konzentrationsgrad in der angegebenen Zeit. So vorbehandelte 
Spermatozoen wurden mit einem kleinen Tropfen Flüssigkeit zu den 
Eiern in sehr viel Wasser gebracht, um die minimale mit über- 
tragene Menge von Farbe unschädlich zu machen. Der für den 
Zweck günstigste Konzentrationsgrad wurde durch Vorversuche fest- 
gestellt. Von Methylenblau wird eine ziemlich große Quantität er- 
tragen. weniger von Neutralrot und Bismarckbraun, ungleich viel 
weniger endlich von Methylgrün. Auf alle Einzelheiten Kommen wir 
S. 193 zurück. 
Was die Technik der Verarbeitung des Materials angeht, 
so bin ich ähnlich damit wie mit Aricia verfahren. Die Fixationen 
wurden so vorgenommen, dab größere Portionen aus den Kulturen 
der normalen oder abnormen Entwicklung auf einmal fixiert wurden. 
Einzelne interessante Objekte wurden während des Lebens be- 
obachtet und auf den erwünschten Stadien festgehalten. Als zweck- 
mäßige Fixiermittel erwiesen sich die 6°/,ige Sublimatlösung in 
destilliertem Wasser mit einem geringen Zusatz von 98° iger Essig- 
säure und das Fremming’sche Gemisch in der von mir meist ge- 
brauchten Zusammensetzung (10 Teile 7,5°), ige Chromsäure, 45 Teile 
destilliertes Wasser, 5 Teile 98°), Essigsäure, 40 Teile 1°/, Osmium- 
siure). Das Sublimatmaterial wurde in lod-lodkaliumlösung, das 
Fremmnwe-Material in Brunnenwasser ausgewaschen. Zu Total- 
präparaten dienten in Sublimat fixierte und mit Cochenille gefärbte 
Objekte, die in Nelkenöl untersucht wurden. Die Schnittpräparate 
passierten Xylol und Paraffin von 52—54° C Schmelzpunkt. Die 
