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g) — sparafflnamento accurato con xilolo. 



li) — lavaggio in alcool °/ . 



i) - rapido passaggio in alcool a 90°/ a 70°/ ed in acqua di- 

 stillata per rimuovere l'alcool. \ _ 



h) - colorazione con soluzione acquosa di tionina ali 1 per 10,000 

 ed all'I per 15.000 per 5-10 minuti nell'estate. 



lj _ lavaggio in acqua distillata e lievemente acidulata con Hcl. 

 La quantità d'acqua deve esser grande, di modo che il preparato possa 

 esser tenuto mosso del continuo. L'acidità deve esser minima, cioè 

 appena rilevabile colla carta di tornasole. Questo lavaggio va prolun- 

 gato sino a che, esaminando direttamente al microscopio, si scorge la 

 sostanza cromatica della cellula nervosa notevolmente scolorita 



m) - passaggio per mezza ad 1 ora in soluzione al 4 °/ ed aci- 

 dulata di molibdato d'ammonio. 



n j _ lavaggio in acqua distillata. 



o) - passaggio in piridina pura, cambiata 3 volte, nella quale 

 le sezioni cedono alquanto di colore, si disidratano e si rischiarano. 



p) - passaggio in olio d'origano cambiato 3 volte per cacciare 



la piridina. . u . 



q) - chiusura del preparato col balsamo sciolto in xilolo. 

 Ed ora poche osservazioni sopra alcuni dei passaggi or ora enu- 

 merati. . ... ,. 



io Innanzitutto è consigliabile per la buona riuscita delle prepa- 

 razioni che la fissazione ed i passaggi h), e), ci), e), siano eseguiti 

 lontano dalla luce ed i pezzi tenuti nella più completa oscurità. Io 

 opero nel seguente modo: estratto dal cadavere o dall'animale il mi- 

 dollo spinale ravvolto nel proprio sacco durale, e trasportato nella 

 camera oscura, quivi, ad una luce rossa appena sufficiente per le ma- 

 nualità da eseguire, apro la dura madre longitudinalmente e, tenendo 

 il midollo sommerso in acqua distillata, pratico alcune sezioni ortogo- 

 nali all'asse midollare di uno spessore non superiore ai 3-4 mm. Trovai 

 conveniente, specie trattandosi dell'uomo, di dividere le singole sezioni 

 in 2 ed anche in 4 parti praticando un primo taglio riunente le due 

 scissure anteriore e posteriore ed un secondo, ortogonale al primo, 

 passante pel canale ependimale. Vengono così isolate le due corna 

 anteriori, dove osservansi, specie nel rigonfiamento lombare, le più 

 grandi e numerose cellule nervose. Dopo la fissazione ed il passaggio 

 W spiccando la sostanza grigia a lato della bianca, si può demolire 

 quest'ultima, riducendo in tal modo le dimensioni dei pezzi e facili- 

 tando così la penetrazione della soluzione di molibdato d ammonio. Con 

 una spatola si portano quindi i pezzetti in una boccetta contenente 

 piridina, che rinchiudo in una scatola a pareti foderate eh carta nera. 

 Tutti i successivi passaggi vengono costantemente fatti in camera 



