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L'auteui" romarqiia que l'addition de carbonate do chaux pure en 

 poudre iine favorise le bon fonclionnonient des cultures quand on 

 réenseraence les masses blanches dans le môme milieu. 



Quand on chaulle pendant dix minutes les cultures à 75°, on 

 trouve que dans les cultures successives, il ne reste que trois orga- 

 nismes : 



l» Le Clostridinm qui |)rédomine ; 



2" Un très fin bacille (0,5 [x) à lonj^s filaments sinueux formant 

 dos spores dans de petits renllements terminaux ; 



3» Un gros bacille, large de 2(7., à longs filaments se transformant 

 f n chaineltes d'articles sporogènes arrondis. 



Celle épuration par la chaleur amène un changement dans 

 l'aspect extérieur des cultures ; il n'y a plus de masses mamelon- 

 nées flottantes ; au contraire, la particule ensemencée dans le 

 liquide neuf, dès qu'elle donnait signe de vio, se fixait sur le car- 

 bonate de chaux fcraie) fondu déposé au fond du vase. Une tache 

 grise se formait, piquée d'innombrables petits trous qui laissaient 

 échapper des bulles de gaz. La corrosion envahissait peu à peu toute 

 la craio, puis les masses blanches réapparaissaient en forme de 

 membrane épaisse couvrant tout lo fond du vase. 



Jusque là toutes les cultures avaient été faites au largo contact 

 de l'air, plusieurs même en présence d'un air constamment renou- 

 velé. Pourtant la marche des expériences était loin d'être régulière, 

 la fermentation commençant difficilement et no s'établissant que 

 lentement. Pour qu'elle eijt lieu, il était nécessaire d'ensemencer 

 les cultures largement avec une semence de la grosseur d'un petit 

 pois. Mais, une fois la fermentation en train, il suf6t de cinq a six 

 jours pour décomposer un gramme de dextrose. 



Les dosages montraient que, dans toutes les cultures où la fer- 

 mentation butyrique avait eu lieu en faisant disparaître des quan- 

 tités notables de sucre, on constatait à la fin des gains d'azote, 

 tandis qu'il n'y en avait pas dans les autres cultures, où on ne cons- 

 tatait que des végétations bactériennes ou des moisissures. 



C'est aux températures de 20 à 30" que l'ont constatait le moins 

 d'irrégularités. 



De plus, il est facile de remarquer que la culture de la combinai- 

 son des trois bacilles est extrêmement favorisée par des doses très 

 faibles d'azote combiné, telles que 2 milligr. d'azote ammoniacal ou 

 nitrique. Il faut alors deux fois moins de temps pour détruire la 

 même quantité de sucre; ces traces d'azote n'ont d'autre elïet que 

 d'amorcer la fermentation. 



Restait la question de savoir lequel de ces trois microbes était 

 l'agent principal de la fixation de l'azote. Pour séparer ces micro- 

 bes, l'auteur employa des placiues faites avec un milieu solide de 

 composition analogue au milieu liquide employé. Mais le Clostri- 

 dium ne poussa pas sur ces plaques. Par contre, les deux autres 

 bacilles, que l'on avait ainsi isolés, furent réensemencés dans le 

 liquide et n'y donnèrent aucun gain d'azote. Par conséquent, le 

 Clostridium, soit seul, soit avec le concours des deux autres 

 bacilles, est l'agent fixateur de l'azote. 



*En essayant de faire des cultures anaérobies sur des tranches de 

 carottes, M. Winogradsky eût la satisfaction de voir que ce procédé 

 isolait le Closlvidium à "l'état de pureté. De plus, ce Clostridium 



